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长期以来,病原真菌引起的植物土传枯萎病一直是农业生产中不容忽视的问题。防治土传病害的传统方法为施用化学农药,但该方法对人体和环境有害。因此,利用有益微生物控制植物病害的生物防治方法已成为农业可持续发展的重要途径。生物防治的主要方法是在植物根际土壤中施加生防菌,在植物根际定殖后发挥防治和控制土传病害的作用,而枯草芽孢杆菌是常用的生物防治菌种。本研究以枯草芽孢杆菌B579为实验对象,在普通蔬菜作物黄瓜的根际土壤进行处理,通过基因组高通量测序技术和土壤关键酶活性分析,阐明了生防菌的施入对根际微生态效应的影响,并制备生防芽孢杆菌B579粉制剂,为今后B579的大田应用奠定理论基础。主要研究内容如下:1.B579对黄瓜根际土壤中微生物多样性的影响通过大田试验将枯草芽孢杆菌B579应用于黄瓜根际土壤中。分别采用四种不同的处理方法,即去离子水处理、F.oxysporum处理、B 579处理和B 579+F.oxysporum处理,每种处理各设3个平行实验组。在黄瓜生长周期期间每四周取样一次,共取样四次。使用土壤基因组DNA提取试剂盒提取所获得的黄瓜根际土壤样品的基因组DNA。将高通量测序技术与巢式PCR产物克隆及测序技术相结合,分析黄瓜根际土壤中细菌和真菌微生物群落的多样性变化。结果表明,与去离子水处理组相比,B579处理组土壤微生物的丰度显著提高,且B579对土壤样品中真菌和细菌的多样性存在不同影响。2.B579对黄瓜根际土壤中关键酶活性的影响为研究在黄瓜根际土壤中施加生防菌B579对土壤关键酶活性的影响,将所取得的土壤样品使用土壤酶试剂盒进行检测。结果表明,生防菌B579的应用显著提高了黄瓜根际土壤中与土壤肥力有关的四种酶活性,即碱性磷酸酶、过氧化氢酶、几丁质酶和脲酶。同时,发现生防菌B579处理组的酶活性最高,其次是拮抗处理组和去离子水处理组,病原菌处理组的酶活性最低。3.B579粉制剂的制备及其参数检测使用具有低成本、化学性质稳定和强吸附性等优秀性能的硅藻土作为载体,以蔗糖作为抗热保护剂,以枯草芽孢杆菌B579为菌种,用物理方法确定发酵液与硅藻土混合的最佳配比,研制成具有生防功能并兼具营养功能的制剂。所制备粉制剂的有效活菌数为3.0×10~111 CFU/g。根据农用微生物粉制剂的制备标准检测粉制剂中技术指标,其中含水量为6.87%,pH值为6.23,细度为94.6%,有效期为7.2个月,各指标均符合要求。