双金属纳米粒子修饰电极的电催化及无试剂电化学免疫传感器研究

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纳米粒子具有优良的电学、磁学、光学性质以及优越的生物相容性,在生化免疫分析、电化学、材料学、电子学、生物医药以及临床诊断等领域越来越显示其重要的作用,本论文旨在合成和构建生物相容性好、催化性能强的单金属或双金属纳米粒子修饰电极,探讨其在生物分析以及生物传感器方面的应用。主要工作分为二个部分:第一部分,首先,用化学还原法制备了Au@Pt核壳结构双金属纳米粒子,并通过自组装方式将其修饰到金电极上,制得Au@Pt/PVP/Au修饰电极(CME)。考察Au@Pt/PVP/Au CME的电化学行为及电催化性能。研究和比较了Au@Pt/PVP/Au CME对中、酸性介质中甲醛的电催化性质。实验表明,Au@Pt/PVP/Au CME对中、酸性介质中的甲醛有良好的电催化作用,催化能力明显优于单独纳米金或纳米铂修饰电极,在酸性情况下对甲醛响应的线性范围为10~400μg/g,检测限为4μg/g;中性情况下对甲醛响应的线性范围为2~760μg/g,检测限为1μg/g。其次,采用电化学沉积法直接制备了Au@Pt核壳纳米粒子修饰电极(Au@Pt/GC CME),通过改变合成双金属纳米粒子时的Au、Pt材料比例,考察不同材料比例的Au@Pt双金属纳米粒子对电极电化学行为及电催化性能的影响。研究和比较了该修饰电极对中性介质中亚硝酸根(NO2-)以及多巴胺(DA)的电催化性质,对NO2-、DA响应的范围分别为5×10-5~5.8×10-3mol/L和2~72μg/g,检测限分别达到2×10-5mol/L和1μg/g。可以用于对微量甲醛以及NO2-、DA的定量测定。研究结果证明,Au与Pt之间存在协同催化作用,双金属纳米粒子更有利于提高修饰电极的电催化性能。第二部分,将粒径均匀、生物相容性好的金纳米粒子和电子媒介体3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB)通过自组装方式修饰到电极上,得到了基于NGs/TMB/Nafion膜的无试剂电化学免疫传感器,采用循环伏安和交流阻抗谱法,考察固载在电极表面的羊抗鼠抗体(Anti-MIgG)与鼠抗原(MIgG)之间的免疫反应以及条件(pH值、培育时间、培育温度等)。实验表明,在pH=5.0的HAc-NaAc溶液中有良好的电化学响应,纳米金(NGs)在其中起到了很好的传导电子以及扩展抗体固载量作用,在最佳实验条件下:pH=5.0、培育时间为30min、培育温度为37℃,该电化学免疫电极的循环伏安行为显示对MIgG有灵敏的响应及较宽的线性检测范围,对MIgG的响应范围为20-120ng/mL,检测限达到ng/mL级。该免疫修饰电极具有良好的选择性和稳定性及再生性能。这种无试剂电化学免疫传感器制作简单、价格便宜、灵敏度高,能进行快速、在线检测。
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