多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是一个具有生殖、代谢和心理特征的重大公共卫生问题,是育龄妇女最常见的生殖内分泌疾病之一。PCOS的主要临床特点有:月经不规律、高雄激素表现或高雄激素血症、卵巢多囊样状态。PCOS的患者具有高度临床异质性,表现包括心理(焦虑、抑郁、身体形象)、生殖(月经不调、多毛、不孕和妊娠并发症)和代谢特征(胰岛素抵抗、代谢综合征、2型糖尿病和心血管危险因素)。由于它的高度异质性,全球尚无统一的诊断标准。高雄激素表现或高雄激素血症仍是其突出特点。目前国内外对PCOS发病机理仍不十分明确,普遍认为遗传、表观遗传及环境等共同作用于疾病的发生。近几年来,国内外开展较多关于PCOS患者的雄激素受体(AR)基因的研究,但多集中在AR基因CAG重复多态性及剪接变体等方面,关于AR突变与PCOS的相关研究报道很少。因此,本研究将从PCOS患者临床、心理特点及AR基因突变与雄激素的关系来探讨AR突变与PCOS的关系。PCOS患者的临床表现中雄激素过多是其典型的特点。临床上表现为多毛、痤疮和男性型秃发,严重影响患者身心健康。雄激素代谢异常是PCOS发病的重要原因。研究发现高雄激素血症是PCOS患者LH分泌增加的一个重要原因,导致卵泡发育障碍、月经失调。高雄激素血症可抑制肝脏对胰岛素的降解,加重肥胖,导致胰岛素抵抗。雄激素过多与胰岛素抵抗、排卵障碍等互为因果,相互促进,相互影响,共同参与和促进PCOS的发生发展。因此,雄激素过多与PCOS关系密切。本研究将从以下三方面进行探讨。首先,通过对PCOS人群与非PCOS不孕症患者临床、实验室指标进行调查分析,寻找PCOS患者的临床实验室特征及可能的相关高危因素。初步建立简单易行的PCOS风险评估模式,对临床管理及防治PCOS高危人群具有重要的意义。其次,通过完成PCOS患者焦虑量表问卷调查,结合患者临床、实验室指标结果,探讨雄激素与PCOS患者心理健康的相关性。为预防PCOS的发生及调整生活方式、提高治疗效果提供科学依据。第三,通过检测PCOS患者AR基因,了解AR突变在PCOS人群中的发生率及潜在致病性突变,构建AR基因野生型和突变型慢病毒载体,感染人卵巢颗粒细胞瘤细胞(KGN),检测AR突变病毒感染KGN细胞后,培养液中各项激素表达情况,分析AR突变与各项激素表达水平之间的关系,探讨AR突变对多囊卵巢综合征患者雄激素的影响。为含AR突变的育龄期多囊卵巢综合征患者的临床诊治提供新的思路和理论依据。第一部分育龄期PCOS患者临床实验室特征研究及危险因素分析目的:分析育龄期PCOS患者的临床实验室特征,探讨PCOS患者发病相关危险因素。方法:通过调阅病历及问卷调查的方式对PCOS患者及非PCOS对照人群进行研究。收集2016年10月至2018年9月在江西省妇幼保健院辅助生殖中心门诊诊断为PCOS的育龄期不孕症患者258例作为研究组。选择同期就诊的520名非PCOS且月经规则的育龄期不孕症患者作为对照组。根据中国2011年PCOS诊断标准,分析PCOS患者与非PCOS对照组的临床及实验室特征及发病相关危险因素。用SPSS 19.0统计软件进行数据分析。结果:1)PCOS组患者平均BMI、月经周期间隔时长、AFC、改良F-G评分、腰臀比及痤疮评分均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。2)PCOS患者的基础LH、T、AMH、FT3、TSH、空腹血糖、甘油三脂均高于非PCOS对照组,而基础FSH、HDL及LDL均低于非PCOS对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。基础E2、PRL、FT4、CA125、总胆固醇与非PCOS对照组相比,无显著性差异(P>0.05)。3)PCOS患者吸烟/被动吸烟比例、压力大小、运动情况、高血压家族史及肥胖家族史占比均高于非PCOS对照组,结果有统计学差异(P<0.05)。而饮酒、PCOS家族史、糖尿病家族史及男性早秃家族史与非PCOS对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:育龄期PCOS患者临床特征表现为月经周期延长、窦卵泡数增多、肥胖(尤其是中心性肥胖)、多毛、痤疮等高雄激素体征;实验室指标特征为高LH、T、AMH。PCOS具有家族遗传性,PCOS的发病可能与压力过大,吸烟/被动吸烟多、缺乏运动等相关。第二部分育龄期PCOS患者焦虑情绪研究目的:探讨育龄期PCOS患者心理及生活质量的影响因素。分析雄激素与PCOS患者心理健康的相关性。为预防PCOS的发生及调整生活方式、提高治疗效果提供科学依据。方法:从已经收集的258例PCOS患者中,在相对私密的环境下对其中147例PCOS患者进行了SAS量表及健康相关生活质量问卷调查。患者病史及基本情况采集如前所述,并进行糖耐量及胰岛素释放试验。使用SPSS 19.0统计软件进行数据处理。结果:1)本研究中147例PCOS患者的平均年龄为28.08±3.24岁;平均BMI23.33±3.4 kg/m~2;平均月经周期间隔短值为28.51±6.34天,间隔长值为102.08±42.25天;月经周期在<90天、90~180天、>180天的例数分别为66例(44.90%)、69例(46.94%)、12例(8.16%);平均不孕年限为3.93±1.45年;合并肥胖者48例(32.65%),中心性肥胖者(WHR>0.8)者126例(85.71%);存在糖耐量受损者36例(24.49%),胰岛素抵抗者114例(77.55%);多囊分型为月经紊乱+PCO型135例(91.84%),月经紊乱+高雄激素状态型0例(0%),月经紊乱+高雄激素状态+PCO型12例(8.16%)。2)147例PCOS患者的焦虑评分结果显示:焦虑检出比例为18.37%,平均得分为40.59±0.79分;轻度焦虑者27人;中度及重度焦虑者0人。3)147例PCOS患者,焦虑组患者痤疮评分、腰臀比、中心性肥胖占比、月经周期、LH/FSH、基础E2、T、血清TSH、甘油三脂、月经紊乱+高雄激素状态+PCO多囊亚型检出比例均高于非焦虑组,差异有统计学意义(P<0.05)。而两组年龄、改良F-G评分、BMI、血压、初潮年龄、月经紊乱时长、总胆固醇、HDL、糖耐量异常检出比例、胰岛素抵抗检出比例均无统计学差异(P>0.05)。4)PCOS患者月经周期越长,焦虑检出比例越高。焦虑检出比例在中心性肥胖组、痤疮组、高雄激素血症组及月经紊乱+高雄激素状态+PCO多囊亚型组更高,差异有统计学意义(P<0.05),而在甲状腺功能异常组、高脂血症组、糖耐量异常组及胰岛素抵抗组,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:PCOS患者经期越长,焦虑检出比例越高;中心性肥胖、痤疮、高雄激素血症、月经紊乱+高雄激素状态+PCO型PCOS患者焦虑检出比例高;PCOS患者的高脂血症、甲状腺功能异常、糖耐量异常、胰岛素抵抗与焦虑情绪无关。第三部分育龄期PCOS患者AR基因突变的相关研究目的:探讨AR基因突变在育龄期多囊卵巢综合征患者中作用。为含AR基因突变的育龄期多囊卵巢综合征患者的临床诊治提供新的思路和理论依据。方法:通过对258例育龄期PCOS患者及520例非PCOS不孕症患者进行AR基因测序分析,寻找AR基因突变患者。进而对突变位点进行生物信息、进化保守性与变异性分析,寻找潜在致病性突变。构建AR基因野生型和突变型慢病毒载体,感染人卵巢颗粒细胞瘤细胞(KGN),观察AR突变后KGN细胞培养液中各项性激素表达变化情况,分析AR突变与各项激素表达水平之间的关系。结果:1)在258例育龄期PCOS患者中发现5例PCOS患者中出现AR基因突变(p.V3M,p.S158L,p.S176R,p.Q72R和p.G396R),而排卵正常不孕患者中未发现AR基因突变。2)p.V3M,p.S158L和p.S176R 3例AR基因突变存在潜在致病性,而p.Q72R和p.G396R 2例突变可能是良性突变。3)3个AR致病性突变组HCG注射日血清E2平均水平为2227.00±184.82pg/mL,明显低于255个AR良性突变或无突变组(3180.24±1710.25 pg/mL)(P<0.01)。3例致病性AR突变患者的基础血清FSH、LH、RPL、CA125及HCG注射日LH和孕酮的水平较高;而LH/FSH值、基础血清E2、T、AMH、甘油三酯、BMI、AFC、月经周期的长度、促性腺激素总剂量及获卵数比255个无或有良性AR突变的PCOS样本低,但差异无统计学意义。4)AR基因突变型感染KGN细胞培养液中T、E2及胰岛素水平均低于野生型。结论:p.V3M,p.S158L和p.S176R 3例突变而非p.Q72R与p.G396R突变可能存在致病性。3例致病性AR突变的PCOS患者的人口学特征更接近于排卵正常的不孕人群,属于非典型PCOS,较无或良性AR突变的PCOS患者,具有更低的BMI,月经周期更短,卵巢内窦卵泡计数更少,血清T水平更低。AR基因突变可能对PCOS患者有保护作用。