抗菌肽Hispidalin于2014年被首次报道,来源于葫芦科药用冬瓜的种子,由49个氨基酸组成,分子量为5.7 KDa,对细菌和真菌致病菌都有较好的抑制作用,有一定的抗氧化功能,具有极大的研究应用价值。本课题中,在巴斯德毕赤酵母（Pichia pastoris）中表达重组抗菌肽Hispidalin（rHispidalin）,并对其诱导条件进行优化,得到最佳诱导表达时间为96h,甲醇浓度为1.5%,此时培养基上清中目的蛋白表达量为99 μg/mL。经镍柱亲和纯化,500 mL培养基上清最终可得3.9 mg目的蛋白,纯度达到92.2%。本课题进一步对rHispidalin进行体外最小抑菌浓度（MIC）实验、抑菌圈实验、杀菌动力学实验、溶血性及细胞毒性实验、细胞膜渗透性实验和抗氧化性实验。结果表明,rHispidalin对于革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均具有抑制作用,MIC值在40-60μg/mL之间,体现广谱抑菌活性。并且对温度和pH的变化具有较强的耐受性,对蛋白酶具有选择耐受性。具有快速杀死细菌的能力,当浓度为4×MIC时,在40 min内完全杀灭数量为1×104 CFU/mL的金黄色葡萄球菌（ATCC 25923）。抗菌肽rHispidalin对人和大鼠的红细胞具有极低的溶血性,对人胚胎肾细胞（HEK293）和乳仓鼠肾细胞（BHK21）具有一定的毒性。抗菌肽rHispidalin能使细菌的细胞膜形成孔洞,细胞内容物流出,破坏膜完整性,从而导致细菌死亡。除以上外,rHispidalin保留了抗氧化的能力,能够有效抑制自由基的形成,包括ABTS+、超氧阴离子、DPPH和羟自由基。最后,将rHispidalin应用于猪肉的冷藏保鲜。结果表明,在7天的冷藏条件下（4℃）,经rHispidalin处理能够有效降低猪肉中菌落总数,延缓蛋白质、脂肪的氧化降解,对于猪肉的感官具有良好的保持作用。并且,当rHispidalin的处理浓度为100μg/mL时,效果最佳。综上所述,rHispidalin极有潜力发展成为一种新型生物防腐保鲜剂,以及抗生素的替代品。