TRPV1参与过敏性鼻炎机制研究

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过敏性鼻炎(allergic rhinitis,AR)又叫做变应性鼻炎,是一种发生在鼻腔鼻粘膜由IgE介导的敏感性增高的慢性炎性疾病。过敏性鼻炎通常表现为打喷嚏、流涕、鼻塞、鼻痒等症状。过敏性鼻炎严重影响人们的工作效率和生活质量,给人们造成巨大的困扰。临床上通常通过一些抗炎和抗组胺、缓解充血药物治疗缓解鼻痒,缺乏比较有效的治疗鼻痒药物。TRPV1是一种在痛痒觉中有重要的作用瞬时电位受体,神经和非神经细胞中均有TRPV1表达。在鼻腔中,鼻粘膜有表达TRPV1受体的细胞,并且TRPV1阳性感觉神经的过度刺激可能导致个体的鼻反应性高和鼻炎症状的发展,且TRPV1受体敲除鼻痒症状有所缓解。黄芩苷是中药黄芩(Scutellariabaicalensis)根茎中主要有效成分,它可以用于治疗各种过敏性疾病,具有免疫调节、抗炎抗过敏、抗氧化等作用,黄芩苷对过敏性鼻炎鼻痒有抑制作用,但对于黄芩苷治疗过敏性鼻炎的机制研究还不够清楚完善。目的证实鼻粘膜有TRPV1阳性感觉神经纤维的投射、研究TRPV1参与过敏性鼻炎鼻痒的机制、阐述黄芩苷治疗过敏性鼻炎的可能机理。实验方法(1)通过使用鸡卵清蛋白(OVA)、Al(OH)3、磷酸盐缓冲溶液(phosphate buffer saline,PBS)建立过敏性鼻炎动物模型。(2)行为学实验监测不同转基因小鼠(TRPV1、TRPA1、Mrgprcluster、MrgprD 受体敲除)和 Kit W-sh 肥大细胞缺陷小鼠痒觉行为的变化,苏木精-伊红染色观察造模和给药处理前后小鼠鼻粘膜炎性状态变化,免疫荧光染色、钙离子成像、电生理、Dil染料逆行追踪实验(1,1’-二十八烷基-3,3,3’,3’-四甲基吲哚菁高氯酸盐)确认有TRPV1阳性的三叉神经神经纤维投射到鼻粘膜。(3)行为学、钙离子成像、电生理实验研究黄芩苷对过敏性鼻炎的治疗作用。结果(1)过敏性鼻炎模型建立结果显示小鼠鼻痒行为显著升高(2)过敏性鼻炎造模后,小鼠行为学结果显示,TRPV1、Mrgpr cluster受体敲除小鼠抓挠鼻子次数显著降低;急性组胺滴鼻实验结果显示,TRPV1受体敲除小鼠相比WT小鼠组胺滴鼻后,抓挠鼻子的次数显著降低(3)黄芩苷可以缓解小鼠过敏性鼻炎的症状,并且钙成像实验表明,黄芩苷可以抑制辣椒素引起三叉神经元的钙离子内流。实验结论三叉神经有TRPV1阳性感觉神经纤维投射到鼻粘膜且TRPV1敲除小鼠过敏性鼻炎症状得到缓解;黄芩苷可以缓解过敏性鼻炎。
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