柑橘是我国重要的果树之一,枳(Poncirus trifoliata)是柑橘生产中应用最为广泛的砧木,大部分柑橘品种不抗寒,枳抗寒但抗旱性较差,因此提高二者抗性对柑橘产业有着重要的意义。基因工程是提高植物抗性的有效途径,其关键是克隆和鉴定重要的抗逆基因。本研究以本实验室已克隆的枳两个基因PtrMYB和PtrF3F1(p-淀粉酶基因)为研究对象,分析了它们在不同逆境条件下的表达模式,通过农杆菌介导遗传转化将其转入烟草(Nicotiana nudicaulis),对转基因植株进行鉴定,并分析它们对在高盐、低温或脱水胁迫的抗性,以鉴定其抗逆功能。取得的主要研究结果如下：1、实时定量PCR分析PtrMYB基因在脱水、高盐、低温不同胁迫和ABA处理下的表达,结果表明,该基因能被上述处理诱导,但其表达模式在不同处理下不同。亚细胞定位分析表明,PtrMYB定位于细胞核。通过农杆菌介导将PtrMYB转化烟草,共鉴定出76株转基因植株,在1#、7#、27#、29#、39#和60#株系中超量表达。对27#和39#两个株系及野生型植株(WT)进行脱水处理,结果表明,两个转基因株系相对失水率和超氧阴离子含量均低于WT,在300m mol/L盐胁迫下,两个转基因株系的黄化程度低于WT,但叶绿素含量比WT高。RT-PCR分析表明,转基因株系中多胺合成相关基因ADC,ODC和SPDS高于WT,并且与PtrMYB基因的表达量正相关。2、PtrF3E1表达水平能被脱水、高盐、低温所诱导,麦芽糖处理则抑制该基因的表达。该基因转化烟草,共鉴定出22个转基因株系,在筛选得到的6#、11#、22#和25#株系中PtrF3E1超量表达。对转基因株系和野生型植株的盆栽苗和无菌苗进行低温和盐处理,表明转基因株系的植株受到伤害比野生型少。