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内毒素休克(endotoxic shock)是临床危重病中常见的症状,可造成多器官损伤,其中以急性肺损伤(acute lung injury; ALI)常见,进一步可导致急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome; ARDS)。内毒素休克所致肺损伤其发病机制复杂,治疗棘手,探讨其发病机制并进行合理有效地治疗仍是国内外研究的热点。我们的前期研究结果表明,血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1, HO-1)在内毒素休克肺损伤时表达增多,可对肺起到一定的保护作用,明确其调节机制对临床制定预防措施具有重要意义。P38MAPK和细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal-regulated kinases, ERK1/2)信号通路是丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-Activated Protein kinase, MAPK)通路中的重要通路之一,是生物体内重要的信号转导分子,在细胞分化、凋亡及炎症等过程中起重要作用。有研究表明,人肾癌细胞内ERK的激活能诱导HO-1表达增多并抵抗细胞凋亡[2],也有研究发现,体外培养的血管平滑肌细胞内受到外界刺激时,可通过p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路诱导HO-1表达上调。至于P38MAPK和ERKl/2信号通路是否介导内毒素休克大鼠受损肺脏HO-1的表达,目前尚未见报道。本课题拟通过建立大鼠内毒素休克肺损伤模型并给予P38MAPK和ERK1/2通路的抑制剂来探讨P38MAPK和ERK1/2信号通路对内毒素休克大鼠受损肺脏内HO-1表达的影响。第一部分：P38MAPK信号通路在内毒素休克诱发急性肺损伤大鼠肺组织中HO-1表达过程中的作用目的探讨P38MAPK信号通路在内毒休克诱发急性肺损伤大鼠肺组织中HO-1表达过程中的作用。方法清洁级雄性SD大鼠48只,体重180g～200g,采用随机数字表法,随机分为4组(每组12只)：对照组(C组)、内毒素休克组(LS组)、内毒素休克+抑制剂组(LSS组)和抑制剂组(B组)。C组和LS组股静脉输注0.1m1DMSO(二甲亚砜),LSS组和B组股静脉P38MAPK阻断剂SB2O35805μmol/kg(溶于0.1m110%二甲基亚砜)；30min后,C组和B组分别给予0.5ml生理盐水,LS组和LSS组分别给予LPS(脂多糖)10mg/kg(溶于0.5ml生理盐水),连续监测平均动脉压(mean arterial pressure, MAP),2h内LS组和LSS组MAP下降≥基础血压25%,认为模型制备成功。根据病理学切片和肺含水率评定肺损伤程度,测定SOD活性和MDA含量,应用荧光定量PCR技术和Western blot技术测定P38MAPK和HO-1的表达。结果与C组比较,LS组和LSS组SOD活性降低,病理学损伤评分、肺含水率和MDA含量升高,肺组织HO-1mRNA和蛋白以及P38MAPK蛋白的表达上调(P均<0.05),B组各指标差异无统计学意义(P均>0.05)；与LS组比较,LSS组SOD活性升高,病理学损伤评分、肺含水率和MDA含量降低,肺组织HO-1mRNA和蛋白表达上调,P38MAPK蛋白表达下调(P<0.05)。结论抑制P38MAPK信号通路可导致内毒素性休克诱发急性肺损伤大鼠肺组织HO-1表达上调。第二部分ERKl/2信号通路在内毒素休克诱发急性肺损伤大鼠肺组织中HO-1表达过程中的作用目的探讨ERK1/2信号通路在内毒素休克诱发急性肺损伤大鼠肺组织中HO-1表达过程中的作用。方法清洁级雄性SD大鼠48只,体重180g～200g,采用随机数字表法,随机分为4组(每组12只)；假手术组(S组)、内毒素休克组(SS组)、内毒索休克+阻断剂组(SE组)和阻断剂组(E组)。S组和SS组股静脉输注0.1mlDMSO(二甲亚砜),SE组不E组股静脉ERK1/2阻断剂PD9805910μmol/kg(溶于0.1mlDMSO);30min后,S组和E组分别给予0.5ml生理盐水,SS组和SE组分别给予LPS(脂多糖)10mg/kg(溶于0.5m1生理盐水),连续监测平均动脉压(mean arterial pressure, MAP),2h内SS组和SE组MAP下降≥基础血压25%,认为模型制备成功。根据病理学切片和肺含水率评定肺损伤程度,测定SOD活性和MDA含量,应用荧光定量PCR技术和Western blot技术测定ERK1/2和HO-1的表达,判断ERK1/2通路在内毒素休克大鼠肺脏HO-1表达过程中的作用。结果SS组的病理学评分、肺含水率、MDA含量明显高于S组和E组(P均<0.05),但低于SE组(P<0.05)；SS组SOD活性明显低于S组和E组(P均<0.05),但高于SE组(P均<0.05)；SS组ERK1/2蛋白、HO-1mRNA和蛋白表达明显高于SE组、S组和E组(P<0.05)；上述指标在S组和E组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论内毒素休克大鼠给予ERKl/2通路的抑制剂后,肺损伤加重,其机制可能与ERK1/2被阻断后HO-1表达减少有关。