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目的:本实验通过探讨速效平喘方对哮喘小鼠急性发作期外周血中 TNF-α及IL-6表达的影响,研究微炎症状态因子TNF-α及IL-6在哮喘小鼠急性发作期的作用地位,从而明确支气管哮喘的免疫发病机制,揭示速效平喘合剂干预哮喘急性发作可能存在的作用机制,为指导临床应用提供理论基础及实验室依据。
方法:将50只清洁健康雄性KM小鼠按随机数字表法分为正常对照组( A)、哮喘组(B)、激素组(C)、中药加激素组(D)和中药组(E)。在第1、8天B组至E组小鼠腹腔内注射卵白蛋白(OVA)和氢氧化铝凝胶混悬液 0.5 ml致敏,而A组同时注射含有氢氧化铝凝胶的生理盐水 0.5ml;在第15天将B组至E组小鼠置于自制有机玻璃激发箱内,给予0.5%的OVA生理盐水溶液2 ml雾化吸入以激发哮喘(每天30 min,连续7 d)。A组小鼠使用生理盐水2 ml进行雾化吸入。第一次诱喘成功后给药(灌胃),共治疗14天。观察整个实验过程中动物的反应情况。实验第28天采集标本,用ELISA法检测小鼠血清中TNF-α及IL-6的水平。采用 SPSS19.0 统计分析软件进行统计分析。实验结果以均数±标准差( ±s)表示,方差齐性时采用ANONA单因素方差分析;方差不齐时,组间比较采用 Welch法,P=0.05为统计检验水准。
结果:1.各组哮喘小鼠发作的潜伏期及哮喘发作时症状轻重程度不同:从造模成功诱喘开始到干预治疗结束,观察小鼠哮喘发作的潜伏期及发作时症状的轻重程度:在干预治疗前,除正常对照组外,各组小鼠哮喘发作的潜伏期及发作时症状轻重基本相当;干预治疗中,哮喘组小鼠哮喘发作潜伏期最短,哮喘发作症状最重,次数最多,持续时间最长;与哮喘组相比,中药组及激素组哮喘潜伏期明显缩短,发作时症状减轻,症状较轻,持续时间较短;与激素组相比,中药组小鼠哮喘潜伏期及发作时症状轻重无显著差异;与中药加激素组相比,中药组及激素组哮喘潜伏期明显增加,发作时症状明显加重。2.各组小鼠血清中TNF-α及IL-6含量不同:与正常对照组相比,哮喘组血清中 TNF-α及IL-6含量明显增高,其差异有显著差异(P﹤0.05),说明 TNF-α及 IL-6 与哮喘急性发作期有关;与哮喘组相比,各治疗组小鼠血清中 TNF-α及 IL-6 有显著差异(P﹤0.05),说明各干预措施治疗有效;与中药组相比,激素组血清中 TNF-α及 IL-6 无明显差异(P〉0.05),无统计学意义,说明速效平喘合剂在降低哮喘小鼠血清中 TNF-α及IL-6与激素疗效相当;与中药加激素组相比,中药组及激组血清中 TNF-α及IL-6有显著差异(P﹤0.05),说明中药联合激素在降低哮喘小鼠血清中 TNF-α及IL-6 比单用一种干预措施效果好。
结论:微炎症状态因子 TNF-α及 IL-6 在哮喘潜伏期及发作期起重要作用,通过降低外周血中TNF-α及IL-6含量,可缩短哮喘潜伏期,减轻哮喘发作症状,缩短持续时间;速效平喘合剂在降低血清中 TNF-α及 IL-6 含量与激素(地塞米松针)疗效相当;两者合用比单一干预因素疗效更确切,为临床中西医结合治疗哮喘提供了理论支持及实验依据。