【摘 要】
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本文选用NOD.H-2小鼠作为研究对象，观察在正常碘摄入基础上接受不同程度的过量碘剂时AIT的程度、甲状腺滤泡上皮细胞凋亡情况和各种凋亡相关蛋白的表达情况，从而将碘、自身免疫和细胞凋亡几个因素结合起来进行综合研究，探讨碘——自身免疫——细胞凋亡之间的关系，研究碘过量对甲状腺内细胞凋亡的影响和凋亡机制在．AITD中的地位和作用。研究方法：分别给予7-8周龄的NOD.H-2小鼠饲以0.05％NaI溶液
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本文选用NOD.H-2
小鼠作为研究对象，观察在正常碘摄入基础上接受不同程度的过量碘剂时AIT的程度、甲状腺滤泡上皮细胞凋亡情况和各种凋亡相关蛋白的表达情况，从而将碘、自身免疫和细胞凋亡几个因素结合起来进行综合研究，探讨碘——自身免疫——细胞凋亡之间的关系，研究碘过量对甲状腺内细胞凋亡的影响和凋亡机制在．AITD中的地位和作用。
研究方法：
分别给予7-8周龄的NOD.H-2小鼠饲以0.05％NaI溶液(相当于小鼠每日正常碘摄入量的1000倍，1000HI)，0.005％NaI溶液(相当于小鼠每日正常碘摄入量的100倍，100HI)和0.001％NaI溶液(相当于小鼠每日正常碘摄入量的20倍，20HI)，在给碘后第4、8、16、32周处死动物，甲状腺经福尔马林固定后，制作石蜡包埋标本，苏木素．伊红染色观察AIT的炎症程度。透射电镜观察不同给碘浓度及时点下甲状腺超微结构的情况。采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测甲状腺滤泡上皮细胞和甲状腺内浸润炎细胞在给碘后各时点以及不同程度的甲状腺炎中的凋亡情况。石蜡切片免疫组化染色方法观察甲状腺滤泡上皮细胞和甲状腺内浸润炎细胞在给碘后各时点以及不同严重程度的甲状腺炎中促凋亡蛋白Fas、FasL和抑凋亡蛋白FLIP的表达情况。同时采用Western blot方法检测甲状腺炎时甲状腺内Fas、FasL和FLIP蛋白的表达情况。
研究结果：
随着给碘剂量的增加和给碘时间的延长，一方面，NOD．H-2小鼠AIT的发病率逐渐增加；另一方面，甲状腺内炎细胞浸润程度逐渐加重，说明甲状腺炎的程度逐渐加重。在少数1000HI给碘超过32周的严重甲状腺炎标本中，可见甲状腺滤泡组织明显减少。甲状腺炎时光镜下可以观察到甲状腺滤泡结构破坏，电镜下出现诸如内质网扩张、胞浆空泡化等甲状腺超微结构的损伤性改变。
正常碘摄入无甲状腺炎的NOD.H-2小鼠甲状腺中未发现甲状腺细胞凋亡。甲状腺炎时可见散在浸润炎细胞的凋亡，仅发现极少数甲状腺滤泡上皮细胞出现凋亡。给予过量碘摄入后，如果NOD.H-2小鼠甲状腺滤泡上皮细胞不表达促凋亡蛋白Fas和FasL。发生甲状腺炎时Fas主要表达在甲状腺内的浸润炎细胞上，部分甲状腺细胞也表达Fas，在1000HI给碘超过32周的甲状腺炎中甲状腺滤泡上皮细胞Fas蛋白表达率最高。甲状腺炎时FasL主要表达在浸润炎细胞上，其表达强度和广度明显低于Fas。与Fas的表达相比，在1000HI给碘超过32周导致的甲状腺炎中甲状腺细胞上仅见极少量FasL表达。甲状腺炎时抑凋亡蛋白FLIP表达在浸润炎细胞上，甲状腺滤泡上皮细胞上未见明确表达。在给碘后无甲状腺炎发生的标本中，未发现碘摄入的增加可以引起甲状腺滤泡上皮细胞表达Fas、FasL和FLIP蛋白。Western blot的结果显示正常碘摄入无甲状腺炎的小鼠Fas、FasL和FLIP的表达均为阴性，甲状腺炎时均可检测到阳性表达。
研究结论：
1、碘过量可以引起NOD．H-2小鼠自身免疫性甲状腺炎的发生，甲状腺炎的发生率和程度与碘过量的严重程度和持续时间有关。
2、碘过量可以引起NOD．H-2小鼠甲状腺滤泡结构的破坏和滤泡上皮细胞超微结构的损伤。
3、无论碘过量是否导致NOD.H-2小鼠发生自身免疫性甲状腺炎，均未发现NOD.H-2h<4>小鼠甲状腺细胞出现明显凋亡。
4、长时间的严重碘过量(1000HI>32周)在引发NOD.H-2小鼠出现自身免疫性甲状腺炎的同时还可以使甲状腺细胞的Fas表达增加。
5、NOD.H-2小鼠自身免疫性甲状腺炎中甲状腺内的浸润炎细胞未出现明显凋亡可能与浸润炎细胞表达抑凋亡蛋白FLIP有关。
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