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目的:口腔鳞状细胞癌（oral squamous cell carcinoma,OSCC）是最常见的恶性肿瘤之一,在头颈部鳞癌中发病率非常高,约占口腔癌的90%,且每年发病率都在增加。虽然OSCC的临床治疗中广泛采用手术、放疗和化疗OSCC的5年生存率仍徘徊在65%左右,晚期患者的生存率不足30%。DNA聚合酶delta亚单位1（DNA polymerase delta subunit 1,POLD1）与多种肿瘤相关并高度表达。然而,POLD1对OSCC的调控尚不清楚。本研究探讨了 POLD1的表达水平对OSCC细胞增殖,迁移,侵袭,细胞周期的影响及其相关机制,从分子水平进行分子靶向研究。方法:通过网上开放的生物信息数据,分析POLD1在头颈部鳞癌及癌旁正常组织中的表达;免疫组织化学染色检测POLD1在40对OSCC组织及癌旁组织中的表达水平;构建插入shRNA（POLD1）的慢病毒载体和空载体,并分别感染SCC9和CAL27细胞系,筛选建立稳转细胞系,并用蛋白免疫印迹实验检测POLD1在稳转细胞系中的沉默效果及其在细胞核、细胞质、细胞膜中的表达水平,其中用含shRNA（POLD1）的慢病毒载体感染并沉默POLD1表达的稳转细胞系称为实验组,用含空载体慢病毒感染的稳转细胞系称为对照组;分别使用CCK-8细胞增殖实验和EDU增殖实验检测POLD1对SCC9和CAL27细胞系增殖能力的影响;使用划痕实验和Transwell迁移和侵袭实验检测POLD1对SCC9和CAL27细胞系的迁移和侵袭能力的影响;收集5位口腔鳞癌患者术前及术后六个月的外周血并进行高通量转录组测序,检测术前术后POLD1（mRNA）表达的变化,进一步探究POLD1作为OSCC分子标志物的潜在可能性;使用流式细胞周期实验检测POLD1对SCC9和CAL27细胞周期的影响;使用蛋白免疫印迹法研究POLD1影响细胞周期的相关机制通路。结果:生物信息学信息数据分析结果显示:POLD1在头颈部鳞癌中表达高于正常癌旁组织（P<0.001）;免疫组化结果显示:POLD1在40对OSCC组织中的表达高于癌旁（P<0.001）;蛋白免疫印迹结果显示:用含shRNA（POLD1）的慢病毒感染SCC9及CAL27细胞系后POLD1表达显著下降,且在细胞核及细胞质中的表达均降低;CCK-8细胞增殖实验及EDU增殖实验结果显示:实验组细胞的增殖能力减弱（P<0.001）;划痕实验和Transwell实验结果显示:实验组细胞侵袭能力下降（P<0.001）;流式细胞周期实验结果显示实验组细胞周期在G2期阻滞,G1期缩短;血液高通量测序结果显示:相比术前,术后6个月POLD1的表达显著降低（P<0.001）;蛋白免疫印迹实验结果显示实验组的P-Cdc2（Tyr15）,P-Rb（Ser807）蛋白表达量相比对照组增高,而Phospho-Chk1（Ser345）,Phospho-Chk2（Thr68）蛋白无明显变化。结论:沉默POLD1表达抑制SCC9和CAL27细胞系的增殖,迁移,侵袭能力:沉默POLD1使SCC9和CAL27细胞周期G1缩短,G2期阻滞。其机制可能与P-Cdc2/P-Rb相关通路有关;OSCC患者术后6个月外周血中POLD1（mRNA）的表达水平显著降低,进一步表明了 POLD1有望成为OSCC的分子标志物。