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目的为解决口腔局部注射麻醉对患者造成的恐惧心理、注射疼痛及副作用,实现口腔安全无痛治疗,本研究采用葡聚糖基纳米类脂质体作为载体包载盐酸阿替卡因合成新型口腔表面麻醉剂 ART-HLD-BNs(Articaine hydrochloride-loaded destran-based niosomes),并与卵磷脂、胆固醇合成的传统脂质体进行比较,评价其经皮渗透性能及初步动物学麻醉效能,为进一步研究提供实验依据。内容与方法1.ART-HLD-BNs的透皮性能研究采用Franz扩散池进行离体小鼠皮肤渗透实验,运用紫外分光光度计测定透皮接收液中阿替卡因的透皮量。应用激光共聚焦显微镜(Confocal Laser Scanning Microscopy,CLSM)观察钙黄绿素-HLD-BNs于活体小鼠腹部皮肤的渗透深度。2.ART-HLD-BNs的动物学麻醉效果初步评价应用家兔角膜刺激实验和蟾蜍坐骨神经动作电位实验,通过观察角膜反射及神经动作电位来对ART-HLD-BNs的麻醉效果进行初步评价。3.ART-HLD-BNs分子生物学水平的麻醉效果研究药物作用于福尔马林致痛下的家兔牙龈,通过检测牙龈、三叉神经节、延髓中的疼痛相关肽SP、CGRP、c-fos的含量探究ART-HLD-BNs的麻醉效果。结果1.离体小鼠 Franz 透皮结果表明,15min、30min、45min、1h、1.5h、2h、3h、4h、5h、6h、8h、10h、12h各时间点,ART单位面积累积透皮量ART-HLD-BNs>ART-CLs(Articaine hydro-chloride-loaded conventional liposomes,载盐酸阿替卡因传统脂质体)>ART-IJ(Articaine hydrochloride injection,阿替卡因注射液)(P<0.05);ART-HLD-BNs 的渗透速率为 26.345μg(h·cm2),分别为 ART-CLs、ART-IJ的1.37和1.85倍;激光共聚焦显微镜观察活体荧光透皮表明CLSM观察发现钙黄绿素-HLD-BNs于1.5h可以渗透小鼠表皮全层,深度达100μm,渗透深度:钙黄绿素-HLD-BNs>钙黄绿素-CLs>游离钙黄绿素(P<0.05)。2.兔角膜刺激实验中,角膜反射消失时间:ART-HLD-BNsART-CLs>ART-IJ,ART-HLD-BNs 和 ART-CLs 组与ART-IJ组差异均具有统计学意义(P<0.05)。蟾蜍坐骨神经动作电位中,各时间点动作电位抑制率ART-HLD-BNs>ART-CLs>ART-IJ;各组在10min时动作电位抑制率达到最大,其中 ART-HLD-BNs 达 79.41%,ART-CLs 为 44.12%,ART-IJ为35.10%,三组组间差异具有统计学意义(F=233.072,P<0.01)。3.各组给药后,相比对照组,牙龈、三叉神经节、延髓处的SP、CGRP、c-fos的蛋白质定量检测30min、60min、90min组均有所下降,不同部位各组下降趋势有所不同。结论1.ART-HLD-BNs具有较强的透皮性能,12h的经皮渗透量和渗透速率均明显大于ART-CLs、ART-IJ,具备表面麻醉剂优良的经皮渗透性能。2.ART-HLD-BNs对于家兔角膜具有良好的麻醉效果,家兔角膜刺激实验中麻醉起效快,麻醉效果持续时间较长。3.ART-HLD-BNs对于蟾蜍坐骨神经动作电位具有较强的抑制作用,起效迅速,抑制时间较长。4.通过作用于牙龈,牙龈、三叉神经节、延髓部的疼痛相关肽SP、CGRP、c-fos均有不同程度的下降,在分子生物学水平探讨其表面麻醉效果。