论文部分内容阅读
目的 以基础是低碘摄入和正常碘摄入的两种碘营养状态的Wistar大鼠为研究对象，动态观察慢性轻中度碘过量对甲状腺氧化损伤和抗氧化能力的影响以及对甲状腺功能的影响，同时做尿碘监测，以保证所选用的碘浓度能符合试验目的的要求。 方法 1．实验动物分组和处理①低碘动物：4周龄Wistar大鼠160只饲以低碘饲料和双蒸水，三个月后复制出低碘甲肿模型，处死10只，剩余150只随机分为三组：低碘对照组、低碘Ⅰ组和低碘Ⅱ组。各组分别饲以双蒸水、含碘100μg／L和330μg／L的碘酸钾水。②普通动物：4周龄Wistar大鼠150只饲以普通饲料和双蒸水，三个月后随机分为三组：正常对照组、高碘Ⅰ组和高碘Ⅱ组。各组分别饲以双蒸水、含碘300μg／L和660μg／L的碘酸钾水。在给予处理因素的1、2、4、8、24周时分别处死大鼠，每次每组处死10只。 2．动物标本采集及制备①尿液：处死前一天将大鼠放入代谢笼中，自由进食及饮水，收集24小时尿液，-20℃冰箱中保存。②血浆：大鼠称体重，乙醚麻醉后，心脏采血，分离血浆，-20℃冰箱中保存。③甲状腺：大鼠经心脏采血处死后，迅速分离甲状腺，去除表面结缔组织，电子天平称湿重，过液氮，-70℃冰箱保存待测。实验前冰浴下用生理盐水将甲状腺制备成5％组织匀浆，3000转离心15分钟，留取上清待测。 3．检测指标①尿碘测定采用砷铈催化分光光度法。②抗氧化指标MDA测定采用TBA法；GSH-Px测定采用谷胱甘肽过氧化物酶法；SOD测定采用黄嘌呤氧化酶法；H2O2测定采用钼酸胺法；组织蛋白测定采用考马斯亮兰法。试剂盒由南京建成生物工程研究所提供，按说明书操作。③甲状腺功能测定采用放射免疫方法检测大鼠血浆TSH，大鼠TSH试剂盒由英国Amersham公司提供；采用放射免疫方法检测大鼠血浆TT4和TT3（双抗法），以及FT3和FT4（包被法），试剂盒均由美国DPC公司提供。结果 1.尿碘浓度与补水碘浓度呈显著正相关，普通动物和低碘动物的相关系数分别为r二0.936和r二0.973。正常对照组的平均MUI为165.9叫犷L，高碘I组平均MUI约为正常对照组的三倍左右，高碘n组平均MUI约为正常对照组的六倍左右。低碘对照组尿碘MUI为19.2例扩L，低碘I组平均MUI约为正常对照组的半倍，低碘n组平均MUI接近正常对照组的三倍。 2.低碘对照组甲状腺湿重和甲状腺相对重量均明显增大，补碘后（低’碘I组和低碘n组）甲状腺湿重及甲状腺相对重量各时点较低碘对照组均明显下降。而低碘I组和低碘n组间甲状腺湿重和甲状腺相对重量无明显差异。普通动物三组间甲状腺湿重和甲状腺相对重量各时点均无明显差异。 3.甲状腺GSH一Px活力在低碘I组1周时有短暂升高，此后随着补碘时间延长，低碘I组和低碘n组甲状腺GSH一Px活力均呈现明显下降趋势，分别在4周和2周后明显低于同期低碘对照组。低碘I组和低碘n组之间甲状腺GSH一Px活力各时点均无显著性差异。高碘I组和高碘11组甲状腺GSH一Px活力均在24周时低于同期正常对照组，而高碘I组和高碘n组之间甲状腺GSH一Px活力各时点均无显著性差异。 4.与低碘对照组比较，低碘I组甲状腺SOD活力在1周时升高，此后随着补碘时间延长，低碘I组和低碘11组甲状腺soD活力均呈现逐渐下降趋势，在8周后明显低于同期低碘对照组。高碘I组、高碘n组和正常对照组之间甲状腺SOD活力各时点均无显著性差异。 5.与低碘对照组比较，补碘后低碘I组和低碘11组甲状腺HZ 02含量明显下降，各时点均明显低于低碘对照组。普通动物补碘后，高碘I组在2周时低于正常对照组，高碘11组在1周时低于正常对照组，其他各时点均无显著性差异。 6.与低碘对照组比较，补碘后低碘I组和低碘n组甲状腺MDA含量明显下降，分别在2周和1周后低于同期低碘对照组。普通动物三组间，高碘I组和高碘n组甲状腺MDA含量在1周时均低于同期正常对照组，其他各时点则无显著性差异。 7.补碘1周时低碘I组和低碘n组GSH一Px/MDA明显升高，显著高于同期低碘对照组，此后随着补碘时间延长而逐渐下降，低碘n组GSH一/MDA在24周时显著低于同期低碘对照组。普通动物三个实验组之间GsH一x/MDA各时点均无显著性差异。 8.碘缺乏使Wi妞大鼠血浆Tf.、F几水平明显降低，马H明显升高，补充100叫扩L和330卜扩L浓度碘后，血浆代、叹水平明显升高，巧H明显降低，Tl’3水平无明显变化，n、水平则在8周和/或24周时下降。 9.非碘缺乏wis往比大鼠补充300叫扩L和6团例扩L浓度碘后，血浆几在1周和24周时低于正常对照组，盯3水平无明显变化，TLj几在1周和（或）2周时低于同期正常对照组，TSH水平无明显变化。结论 1.碘缺乏WIStar大鼠补充100叫犷L浓度碘后，甲状腺肿大得以部分恢复，但未能恢复到正常甲状腺水平。同时甲状腺氧化损伤程度减轻，甲状腺内抗氧化酶活力相应地下降，但甲状腺综合抗氧化防御能力并无下降，因此碘缺乏大鼠补充100叫扩L浓度碘是安全的。 2.碘缺乏Wistar大鼠补充330叫犷L浓度碘后，甲状腺肿大得以部分恢复，但未能恢复到正常甲状腺水平。同