论文部分内容阅读
目的：本实验通过研究冠心病(CHD)患者共刺激分子CD40/CD40配体(CD40L)系统、CD134/CD134配体(CD134L)系统在CHD患者外周血CD4+T淋巴细胞上的表达情况,探究相关免疫机制在CHD中的作用,并体外应用不同浓度环孢素A(CSA)干预CD4+T淋巴细胞共刺激分子CD40/CD40L系统、CD134/CD134L系统的表达,为以CD40/CD40L系统、CD134/CD134L系统为靶点的疾病治疗提供切实有效的数据,同时为利用免疫抑制剂治疗CHD开展新的思路与方法。方法：选择2013年3月-2014年1月天津市胸科医院心内科收治的冠心病或疑诊为冠心病患者71例,依据临床表现及心电图、超声等诊断方法,按照疾病严重程度不同分为4组：急性心肌梗死组(AMI)19例、不稳定型心绞痛组CUAP)18例、稳定型心绞痛组(SAP)17例和17例正常对象为对照组(N)；抽取正常对照组(17人)和冠心病组(54人)外周血,进行冠脉造影检查及相关血液生化指标测定并收集基础资料,用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)；利用流式细胞分析技术,分析各组PBMCs中CD4+T淋巴细胞上CD40/CD40L、CD134/CD134L系统的表达百分率,筛选共刺激分子表达率最高的组别；在加入不同浓度CSA(浓度梯度：0、0.1、0.01、10μg/mL)的情况下,刺激培养共刺激分子表达率最高组别的PBMCs,培养72小时后再次利用流式细胞分析技术,分析各亚组CD40/CD40L、CD134/CD134L系统的表达百分率。本研究在细胞水平上评价CSA对CD4+T淋巴细胞共刺激分子CD40/CD40L. CD134/CD134L系统表达的影响。应用SPSS18.0软件进行统计分析,P<0.05差异有统计学意义。结果：(1)各组间年龄、LDL-C、Gensini积分、FT3、HDL-c等化验指标比较,统计学上有显著性差异(P<0.05),其中年龄、LDL-C、Gensini积分在不同病变程度组间依次升高,FT3、HDL-c在不同疾病严重程度组间依次降低。各组间其余基础资料比较无统计学差异(P>0.05)。(2)CD4表达情况：与N组比较SAP组、UAP组、AMI组CD4表达均出现升高,且随着病变程度的增加而增加,差异有统计学意义(P=0.001)；CD40表达显示：SAP组、UA组、AMI组CD40表达较N组升高且有统计学差异(P=0.001),SAP组与UA组、AMI组比较有统计学差异(P<0.05),UA组与AMI组比较无统计学差异(P>0.05)；CD40L表达显示：SAP组、UA组、AMI组中CD40L表达较N组增高,表达百分数在不同病变程度组间依次升高,两两比较差异均有统计学意义(P=0.001)。CD134、CD134L分子表达情况：AMI组、UA组CD134表达较N组增高,且有统计学意义(P<0.05),其余两两比较差异均无统计学意义(P>0.05),CD134L表达在不同病变程度组间进行两两比较结果均无显著性差异(P=0.17)。(3)相关性分析：Gensini积分与CD40、CD40L表达量之间呈正相关(P=0.001),即随着Gensini积分的增力CD40、CD40L表达量也增加,与CD134、CD134L不相关(P=0.693/0.892)。(4)研究证实AMI组各种共刺激分子表达率最高,AMI组中CD40表达量在CSA干预浓度0.1μg/mL、1μg/mL组低于0μg/mL、0.01μg/mL组(P<0.01),其余两两比较结果显示差异无统计学意义(P=0.076/0.552)；CD40L表达百分数在CSA干预浓度0μg/mL、0.01μg/mL、0.1μg/mL组间两两比较均有统计学意义(P=0.001),并随CSA干预浓度的增加呈逐渐降低的趋势,而0.1μg/mL组与1μg/mL组比较,差异无统计学意义(P=0.585)；CD134及CD134L表达百分数在CSA不同干预浓度四组间显示随CSA干预浓度的增加呈逐渐降低的趋势,但组间两两比较结果显示差异均无统计学意义(P=0.779/0.721)。结论：正常人及冠心病患者外周血CD4+T淋巴细胞均可以表达共刺激分子CD40/CD40L、CD134/CD134L系统。相比较CD134/CD134L,CD40/CD40L系统通过免疫机制更多的参与冠心病的发生与发展,CD134、CD134L并无明显作用；CSA通过抑制AMI患者外周血CD4+T淋巴细胞共刺激分子CD40/CD40L系统的表达,可以抑制动脉粥样硬化的形成,但对CD134/CD134L系统无作用,其作用机制尚不明确,因此尚不能确定CSA对CHD有治疗作用。