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EB病毒（Epstein-Barr virus，EBV）潜伏感染与鼻咽癌(Nasoparyngealcarcinoma，NPC)的发生密切相关，在肿瘤细胞中EBV的存在，为NPC的免疫治疗提供了靶位。EBV属于疱疹病毒γ亚科，在NPC中可以表达EB病毒核抗原1（EB nuclear antigen1，EBNA1）、潜伏膜蛋白1(Latent membrane protein1，LMP1)、潜伏膜蛋白2(Latent membrane protein2，LMP2)。LMP2因其可以诱导很好的特异性CTL应答效果，使其成为NPC治疗的良好靶向位点。 骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells，MSCs)是一种具有自我复制能力和多向分化潜能的干细胞，具有易于分离、增殖快的优点。因其具有较低的免疫原性，使其输入体内后不会被排斥，在宿主体内可以长期存活，此外，MSCs还易于外源基因的插入以及转化，以上优点均使得MSCs被广泛应用于疫苗研究领域。 首先，本次实验通过贴壁培养法，成功获得较高纯度的MSCs，光镜下观察该细胞成梭形或椭圆形，为典型的间充质干细胞形态。流式细胞术检测原代培养7d的小鼠MSCs，结果显示，带有CD29单独表面标记阳性细胞率为93.2％，带有CD44单独表面标记阳性，细胞率为96.4％，CD29和CD44表面标记双阳性细胞率为91.8％，实验结果提示通过贴壁分离法已经获得纯度较好的小鼠MSCs。 其次，对荧光素酶在小鼠MSCs中的表达进行了检测。利用Ad5-LUC感染常规分离法获得的小鼠MSCs，按照不同的时间顺序，依次检测荧光素酶活性。结果表明，第1d即可检测到荧光素酶活性，并随感染时间的延长，荧光素酶活性值逐渐增强，直到感染第4d达到峰值，之后荧光素酶活性值随感染时间的延长逐渐下降，直到第8d仍可以检测到。将MSCs-LUC免疫Balb/c小鼠后，按照免疫时间不同，对免疫后小鼠进行活体成像法检测，检测结果显示，随免疫时间的延长，生物素荧光强度逐渐增强，直到免疫后第2d达到峰值，之后荧光强度随免疫时间的延长逐渐降低，到第7d仍有可以检测到，说明免疫小鼠体内的MSCs在第7d后仍可以很好的进行外源基因表达。 除此之外，本次实验利用MSCs作为细胞载体，利用Ad5-LMP2感染小鼠MSCs后，将负载EBV LMP2的MSCs免疫小鼠，并对其免疫效果进行探究。PCR方法检测结果显示，MSCs-LMP2细胞中存在LMP2的基因;RT-PCR方法检测结果显示，MSCs-LMP2中LMP2可以很好的进行转录;间接免疫荧光、流式细胞术、Western-blot法在蛋白水平上检测MSCs-LMP2，实验结果均显示，MSCs-LMP2中表达的蛋白与预期结果一致;MSCs-LMP2免疫小鼠后，血清学实验结果显示，MSCs-LMP2免疫组小鼠血清中存在LMP2特异性抗体;Elispot方法检测免疫后小鼠脾淋巴细胞中LMP2特异性CTL水平，结果表明，MSCs-LMP2免疫组明显可以诱导小鼠产生特异性CTL应答，可以激起很好的细胞免疫应答水平。 综上所述，经检测MSCs-LMP2可以表达LMP2，且免疫小鼠后可以诱导机体产生很好的特异性细胞免疫应答效果和抗体水平，为传统鼻咽癌的治疗提供了实验方法。