加味桃红四物汤治疗急性脊髓损伤的实验研究及临床应用

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第一部分加味桃红四物汤治疗大鼠急性脊髓损伤的实验研究目的探讨加味桃红四物汤对大鼠急性脊髓损伤(Acute Spinal Cord Injury, ASCI)后神经结构和功能的治疗作用,为临床治疗脊髓损伤提供理论指导。方法实验采用雌性SD大鼠104只,随机分成四组:A组(加味桃红四物汤组,n=32)、B组(桃红四物汤组,n=32)、C组(损伤对照组,n=32)、D组(正常对照组,n=8)。运用改良Allen’s法打击大鼠胸12节段脊髓制备成不完全瘫痪模型。A、B组自造模后即进行中药治疗;C组自造模后给予等容量生理盐水作对照;D组为正常大鼠,不做任何处理。于伤后1d、3d、7d、14d、28d对每组大鼠进行BBB评分(The Basso, Beattie&Bresnahan Locomotor Rating Scale, BBB评分);于伤前1d、伤后1d、14d、28d对A、B、C三组大鼠行体感诱发电位(somatosensory evoked potential, SEP)检测;于伤后1d、3d、7d、14d抽取各组大鼠血液标本(颈动脉)及时离心后进行血浆血小板活化因子(plasma platelet activating factor, PAF)及纤维蛋白原(fibrinogen,FIB)测定;于术后1d、3d、14d、28d取脊髓标本,进行HE(hematoxylin-eosin, HE)染色及神经胶质原纤维酸性蛋白(Glial Fibrillary Acidic Protein, GFAP)、Bcl-2(B-cell lymphoma/leukemia-2, Bcl-2)蛋白、水通道蛋白-4(aquaporin-4, AQP-4)的免疫组化染色,以观察脊髓打击伤后的病理变化。所得数据用SPSS16.0统计软件进行分析。结果1、行为学评分:急性脊髓损伤后,大鼠双后肢BBB评分明显下降,伤后当天评分皆为0,随着术后时间的延长,大鼠双后肢运动功能表现出不同程度的恢复。伤后3d、7d、14d、28d,A、B两组恢复速度较C组快(P<0.05),同时A组的恢复速度又快于B组(P<0.05)。2、体感诱发电位(SEP):急性脊髓损伤后,大鼠双后肢感觉诱发电位潜伏期明显延长,波幅明显降低,随着术后时间的延长,潜伏期及波幅均表现出不同程度的恢复,加味桃红四物汤干预后潜伏期及波幅恢复明显增快(P<0.05)。3、血浆血小板活化因子(PAF)及血浆纤维蛋白原(FIB)检测:急性脊髓损伤后,血浆PAF和FIB含量明显升高,随着术后时间的延长,血浆PAF和FIB含量均表现出不同程度的恢复,加味桃红四物汤干预后血浆PAF及FIB含量降低增快(P<0.05)。4、组织病理学(1)GFAP免疫组化结果:脊髓损伤后,星型胶质细胞明显活化增值,GFAP的表达明显上调,加味桃红四物汤干预后,GFAP的表达减缓(P<0.05)。(2)Bcl-2免疫组化结果:脊髓损伤后1d,即出现阳性表达的细胞,伤后3d达到高峰,此后逐渐下降,持续到28d时仍有少量表达。加味桃红四物汤和桃红四物汤干预后可升高Bcl-2的表达(P<0.05),加味桃红四物汤的作用优于桃红四物汤(P<0.05)。(3)AQP-4免疫组化结果:脊髓损伤后1d,即出现阳性表达的细胞。伤后3d达到高峰,此后逐渐下降,持续到28d时仍有少量表达。加味桃红四物汤和桃红四物汤干预后AQP-4的表达较C组缓慢(P<0.05),加味桃红四物汤的作用优于桃红四物汤(P<0.05)。结论加味桃红四物汤和桃红四物汤均可促进大鼠双后肢行为学及神经电功能的恢复,均可抑制ASCI大鼠血浆PAF和FIB的含量,减轻脊髓水肿,减少瘢痕的形成和损伤局部细胞的凋亡,从而使残存脊髓组织保存并促进脊髓功能的恢复,但加味桃红四物汤的作用优于桃红四物汤。第二部分加味桃红四物汤在胸腰椎骨折并不全瘫前路减压术后的应用目的探讨加味桃红四物汤配合前路手术治疗胸腰椎骨折并不全瘫的临床效果。方法严格筛选2010年3月至2011年9月符合病例纳入标准及排除标准的患者共48例。按照入院先后顺序随机分为治疗组(A组,n=25)和对照组(B组,n=23),两组病例均为胸腰椎骨折并不全瘫前路切开减压内固定的患者。B组给予激素、脱水等常规治疗,A组在此基础上口服加味桃红四物汤。于治疗前及治疗28d天后,用ASIA评估标准评分。所得数据用SPSS16.0统计软件进行分析。结果治疗28d后,两组患者双下肢感觉、运动均表现出不同程度的恢复。在触觉和痛觉改善方面,A、B两组比较无统计学差异(P>0.05);在运动评分及ASIA分级比较,A组明显优于B组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论加味桃红四物汤有助于胸腰椎骨折并不全瘫前路减压术后神经功能的恢复。
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