CRISPR/Cas9是一个简单、高效可用于动植物基因组工程的RNA引导的编辑工具。近些年,将其组件Cas9 m RNA和sg RNA注射到食蟹猴受精卵细胞质研制基因敲除动物。灵长类动物作为建立基因突变相关的人类疾病动物模型具有重要意义。然而,鉴于食蟹猴研究费用高,妊娠期长,饲养成本高的生理特性。较难获得食蟹猴胚胎,并且从胚胎及胎儿获得准确基因修饰的信息所需时间长。在难以改变食蟹猴生理特性的前提下,降低研制基因修饰猴的费用和提高其效率的重要方法就是提高CRISPR/Cas9编辑的效率。选择高效的sg RNA和优化CRISPR/Cas9编辑效率成为本论文主要研究目标。为此,本论文设计了两个连续的实验,首先预测sg RNA序列碱基趋势性,在此基础上设计效率差异大的两种sg RNA在食蟹猴胚胎上测试,其次,研究C-端结合蛋白的相互作用蛋白（C-terminal-binding protein interacting protein,Ct IP）对Cas9及低活性sg RNA效率的影响。实验一:首先做体外活性检测,选择了15条做过体内外活性检测sg RNA分别注入胚胎中,sg RNA（50 ng/μL）、Cas9 m RNA（100 ng/μL）混合。检测其效率并与常见的sg RNA设计网站上效率评分对比,发现存在较大差异。并由此提出sg RNA可能具有物种差异性。将在食蟹猴胚胎上测试效率的67条sg RNA纳入分析,并对sg RNA各个位置做了一个统计,得到了关于灵长类动物胚胎sg RNA的趋势性分析,针对较为符合趋势和不太符合趋势的两条sg RNA在食蟹猴胚胎上测试,单克隆结果表明sg RNA 2活性明显高于sg RNA 3。并对sg RNA 2进行脱靶分析。实验成功的证明了我们的趋势分析可以筛选出高活性sg RNA,且和脱靶无直接相关性。实验二:对低编辑效率的sg RNA分析,猜测可能断裂的DNA以姐妹染色体为模板完成修复,导致基因编辑失败。想通过加入Ct IP蛋白提高非同源末端修复的方式来提高CRISPR系统编辑效率。我们第一次在载体中混入300 ng/μL Ct IP蛋白,未检测到低活性sg RNA-T工作。我们第二次在载体中混入500 ng/μL Ct IP蛋白,仍然未检测到低活性sg RNA-T工作。我们将1 cell和2 cell收集到一管,通过PCR测序的方法检测,没有检测到活性。实验结果证明了Ct IP蛋白并不能提高使用低活性sg RNA后CRISPR的编辑效率。我们得到了一个关于设计高效灵长类动物胚胎sg RNA的趋势分析,并探索了Ct IP分子在胚胎中与CRISPR系统的编辑效率。这些结果为提高CRISPR系统在灵长类动物胚胎活性提供了方向。我们希望在更多数据的支持下再加以结合现在已经报道的相关论点我们会得到一个更加完整的关于食蟹猴胚胎sg RNA的活性评分方法。从而大大减少不确定性,扩展食蟹猴基因组工程的实际可能性。