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2-花生四烯酸甘油一酯(2-Arachidonoylglycerol,2-AG)是一种内源性脂质信号分子,在中枢神经系统、心血管系统和免疫系统中发挥着众多生理功能。2-AG具有潜在的药用价值,以期用于治疗肥胖症、慢性疼痛、焦虑症和抑郁症。Sn-2位富含花生四烯酸(Arachidonic acid,ARA)的对称性甘油三酯(Triacylglycerols,TAGs)具有类似2-AG的生理功能,且氧化稳定性较好;同时,此类对称性TAGs具有较简单的脂肪酸组成和分布,易被人体消化吸收,也有利于开展相关功能性的研究。本课题利用脂肪酶的催化活性高、专一性强、反应副产物少以及反应条件温和等优点,探索了酶法合成sn-2位富含ARA的甘油一酯(Monoacylglycerols,MAGs)以及对称性TAGs的方法。首先,以富含ARA的微生物油脂为原料,酶法催化乙醇醇解反应合成2-甘油一酯(2-monoacylglycerols,2-MAGs)。探究了脂肪酶类型、醇解反应体系、底物质量比、脂肪酶添加量和反应时间对醇解反应产物中2-MAGs含量的影响。单因素实验结果显示,酶法催化醇解反应的最优条件为:无水乙醇和微生物油脂的底物质量比为4:1,脂肪酶Novozym 435的添加量为10%,在25?C下反应3 h。在该反应条件下,2-MAGs在醇解反应产物中约占33%。进一步对醇解反应产物进行分离提纯,使用溶剂萃取法去除反应产物中的脂肪酸乙酯等杂质,所得2-MAGs的纯度为96%,纯化回收率为80%;再用低温结晶法去除2-MAGs中饱和脂肪酸和部分不饱和脂肪酸的2-MAGs,得到纯度约为65%的2-AG,纯化回收率为67%。其次,确立了以棕榈酸乙烯酯作为2-MAGs的酰基供体酶法催化酯交换反应合成sn-2位富含ARA的对称性TAGs的方法。探究了脂肪酶类型、酯交换反应体系、正己烷添加量、反应温度、脂肪酶添加量和反应时间对酯交换反应产物中对称性TAGs含量的影响。单因素实验结果显示,该酶法酯交换反应合成对称性TAGs的最优条件为:棕榈酸乙烯酯和2-MAGs的底物摩尔比为2.5:1,脂肪酶Lipozyme RM IM的添加量为10%,在30?C下、0.5 m L正己烷体系中反应2.5 h。在该反应条件下,对称性TAGs在酯交换反应产物中约占72%,反应效率明显优于以棕榈酸作为酰基供体的酶促反应。采用低温结晶法纯化酯交换反应产物对称性TAGs,所得对称性TAGs的纯度为98%,纯化回收率为85%。