论文部分内容阅读
背景:原发性肝癌是人类最常见的恶性肿瘤之一,全球每年新患肝癌人数为62.6万人,因肝癌死亡者高达59.8万人。而新发肝癌病例中50%以上发生于中国,因此我国的肝癌诊治形势十分严峻,目前针对原发性肝癌的治疗手段主要包括手术切除、肝移植术、微创治疗、放化疗及生物治疗等,但总体疗效均较差,5年生存率仍不足5%。热疗就是应用各种致热源提高人体的体温至有效的治疗温度范围并维持一定时间,利用热效应及继发的生物效应选择性杀灭癌细胞、控制癌细胞广泛转移的治疗方法。研究表明:热疗可以诱导肿瘤细胞发生凋亡,与化疗具有协同杀伤效应,但热疗诱导凋亡的具体分子生物学机制仍未完全研究透彻,热效应直接的生物靶点可能是细胞膜及细胞器。线粒体作为真核细胞内一种重要的细胞器,其结构和功能改变与细胞凋亡的关系十分密切:在促凋亡因子的刺激下,线粒体膜通透性转运孔(MPTP)开放,线粒体跨膜电位(△ψm)降低或丧失,线粒体基质中释放出凋亡蛋白,诱导细胞凋亡。因此,可以认为△ψm的紊乱是细胞内线粒体凋亡通路激活的早期事件之一。目的:本研究旨在探讨聚束微波加热诱导人肝癌细胞株BEL-7404凋亡的效应、聚束微波加热联合顺铂对人肝癌细胞株BEL-7404的协同效应及与线粒体跨膜电位(△ψm)的关系。方法:建立聚束微波加热细胞体外培养模型,通过Annexin V-FITC/PI法和MitoCapture法配合流式细胞仪检测空白对照组、顺铂组、(40℃-43℃,2h)聚束微波加热组及(40℃-43℃,2h)聚束微波加热联合顺铂组对人肝癌细胞株BEL-7404凋亡率及线粒体跨膜电位的变化情况。结果:(42℃,2h)聚束微波加热可以诱导人肝癌细胞株BEL-7404发生凋亡,同时伴随着细胞内线粒体跨膜电位的下降,随着温度升高至43℃,发生凋亡和线粒体跨膜电位下降的细胞数进一步增多;(42℃,2h)聚束微波加热联合顺铂与单用顺铂或单用聚束微波加热相比,可以诱导更多的人肝癌细胞株BEL-7404发生凋亡和线粒体跨膜电位的下降,热化疗具有协同效应,随着温度升高至43℃,发生凋亡和线粒体跨膜电位下降的细胞数进一步增多,热化疗的协同效应更加明显。结论:(42℃-43℃,2h)聚束微波加热可以通过诱导人肝癌细胞株BEL-7404凋亡而发挥其抑制肿瘤细胞增殖的作用;(42℃-43℃,2h)聚束微波加热可以降低人肝癌细胞株BEL-7404线粒体跨膜电位的水平;(42℃-43℃,2h)聚束微波加热联合顺铂对人肝癌细胞株BEL-7404具有协同效应;线粒体跨膜电位的改变可能是(42℃-43℃,2h)聚束微波加热诱导凋亡及(42℃-43℃,2h)聚束微波加热联合顺铂发挥协同效应的机制之一。