pH响应的Fe-Gallic Acid纳米颗粒在光声指导下对肿瘤的光热治疗

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目的:由于纳米技术在精准医学方面的巨大潜力,以及纳米材料与不同功能性药物相结合在医学治疗和诊断方面引起了广泛的关注。到目前为止,有大量诊断治疗剂即可用于不同的成像造影技术也可用于治疗技术,例如:核磁共振-光热治疗(MRI-PTT),光学影像-光热治疗(Opticalimaging-PTT),核磁共振-化疗(MRI-Chemotherapy),计算机断层扫描-光热治疗(CT-PTT),光声成像-光热治疗(PAI-PTT);然而目前文献中报道的诊疗一体化试剂,大多数都是由单一功能试剂组合而成,其在体内循环和代谢期间很容易彼此分离,致使诊断和治疗效果明显降低。因此,我们希望合成一种基于单个材料的诊疗一体化试剂,其既具有成像造影功能、又可以作为治疗剂,从而获得更好的肿瘤诊断及治疗效果。方法:(1)通过简单的将FeCl3(10 mM)溶液和Gallic Acid(15 mM)溶液相互混合,用0.1M HEPES缓冲溶液将其pH值调到3.7,然后在常温下孵育2h,获得Fe(Ⅲ)-Gallic Acid纳米颗粒(NPs),通过高分辨率透射电子显微镜(HRTEM)、纳米激光粒度仪动态光散射系统(DLS)、紫外-可见分光光度计等方法测定表征,并通过光声成像和光热循环实验来评价Fe(Ⅲ)-Gallic Acid NPs体外光声和光热稳定的效果。通过(0.1M)HEPES缓冲溶液将Fe-Gallic Acid NPs溶液调至不同pH的情况下及含有10%FBS时,测定其p H的敏感性和稳定性。(2)通过MTT实验探究Fe(Ⅲ)-Gallic Acid NPs对4T1细胞(小鼠乳腺癌细胞)的细胞毒性;经近红外激光照射(808nm,0.5W/cm2,10min)Fe-Gallic Acid NPs后,用MTT实验来探究Fe-Gallic Acid NPs光热消融癌细胞的效果。4T1细胞经过含有Fe-Gallic Acid NPs的培养基处理后,用波长为808nm激光器,经不同功率的激光照射;对照射后的细胞进行Live-Dead染色,观察不同功率激光照射细胞后细胞的存活状态。(3)通过尾静脉将Fe(Ⅲ)-Gallic Acid NPs溶液注射到荷瘤的小鼠体内,利用光声断层扫描仪(PAI)对肿瘤部位进行光声成像并对接种肿瘤的小鼠进行光热治疗,每天记录肿瘤的生长情况以及小鼠的生存率,观察Fe(Ⅲ)-Gallic Acid NPs在活体水平的肿瘤光热治疗效果;45天后处死并收集治疗组小鼠的主要器官进行H&E染色,与正常小鼠器官组织相对比。结果:我们成功合成了一种结构简单、生物相容性高,且具有高度pH敏感性的纳米颗粒;可根据pH值的不同来调节Fe-Gallic Acid NPs尺寸大小;不仅如此,由于纳米颗粒的pH敏感性,其在中性环境中可分解成小分子复合物代谢出体外,而在弱酸的肿瘤微环境更易富集。Fe(Ⅲ)-Gallic Acid NPs也展现了良好的近红外吸收能力,优异的光热转换效率使其在光声成像与光热治疗中也具有良好的成像效果。经静脉注射Fe(Ⅲ)-Gallic Acid NPs到荷瘤小鼠的体内后,可通过光声成像对小鼠肿瘤进行诊断,并利用光热治疗可以精确而又彻底的消灭肿瘤细胞。本文构建的pH响应性的纳米颗粒,其在动物模型光声成像与光热治疗方面的研究为开发癌症诊断与治疗剂方面提供了一种新的策略。
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