1目的临床研究观察孕育丹糖浆对肾阳虚型多囊卵巢综合征不孕症患者生殖及内分泌的影响。动物实验基于PI3K/Akt信号通路,通过不同给药方案干预多囊卵巢综合征大鼠,深入探讨孕育丹糖浆对该通路相关分子表达的影响,从而在通路信号分子层次探索孕育丹糖浆改善多囊卵巢综合征患者卵巢功能及促进排卵的可能机制,为温补肾阳中药防治多囊卵巢综合征不孕症提供科学严谨的依据。2方法将纳入研究的66例肾阳虚型多囊卵巢综合征不孕症患者,随机均分为两组。对照组患者于月经周期第5天开始口服来曲唑片,每次1片,每日1次,连服5天。从月经周期第9天隔日行阴道超声监测卵泡情况。当最大卵泡直径≥18mm时,立即肌注注射用绒促性素10000U。治疗组在对照组基础上,于月经周期第5天开始加服孕育丹糖浆40ml/次,连服14天。疗程均为3个月经周期。比较两组患者排卵率、妊娠率及中医证候积分、临床疗效的差异;检测治疗前后血清睾酮（T）、促黄体生成素（LH）和促卵泡生成素（FSH）的水平,并对数据进行统计学分析。6周龄的雌性SD大鼠,随机分为正常组（10只）、造模组（50只）。造模组灌胃来曲唑以诱导多囊卵巢综合征大鼠模型。验证模型成功后,将成模大鼠随机分为模型组、孕育丹糖浆低、中、高剂量组及西药组。根据相应的干预方式,所有大鼠每日同一时间灌胃给药1次,持续12天。用药最后5天每天行阴道涂片,观察动情周期。实验结束后所有大鼠腹主动脉取血,ELISA法检测大鼠血清雌二醇（E2）、T、LH、FSH的水平;大鼠卵巢切片后行HE染色,显微镜下观察各级卵泡发育情况;Westen blot法检测大鼠卵巢PI3K、Akt蛋白的相对表达水平;Real-time q PCR法测定大鼠卵巢PI3K、Akt m RNA的相对表达水平。对检测数据进行统计学分析。3结果临床研究结果3.1治疗前后中医证候积分的比较比较治疗前两组患者的中医证候积分,组间差异无统计学显著性。两组患者治疗前后组内比较,中医证候积分均较前明显减少,P均＜0.05;两组患者治疗后组间比较,治疗组中医证候积分较对照组明显减少,P＜0.05;比较结果均有统计学差异。3.2治疗后排卵率的比较治疗组24人有排卵,排卵率为80%;对照组16人有排卵,排卵率为53.33%。两组患者治疗后排卵率有明显差异（P＜0.05）。3.3治疗后妊娠率的比较治疗组14人妊娠,妊娠率为46.67%;对照组6人妊娠,妊娠率为20.00%。两组患者治疗后妊娠率有明显差异（P＜0.05）。3.4治疗前后性激素水平的比较（1）两组患者治疗前T、LH、LH/FSH指标进行组间比较,P值分别为0.267、0.139、0.212,数据均无统计学显著性差异。（2）两组患者治疗前后T、LH、LH/FSH指标进行组内比较,差异均有统计学显著性（P均＜0.05）。（3）两组患者治疗后T、LH、LH/FSH指标进行组间比较,P值分别为0.000、0.001、0.000,比较结果均有统计学显著性。3.5治疗后临床疗效比较治疗组有14例临床痊愈,10例有效,总有效率为80%。对照组有6例临床痊愈,10例有效,总有效率为53.33%。治疗组总有效率较对照组高,数据比较结果有统计学差异（P＜0.05）。实验研究结果3.1阴道涂片正常组大鼠动情周期规律;模型组大鼠基本处于动情间期,失去周期性变化的特征;孕育丹糖浆各剂量组和西药组大鼠的动情周期基本恢复周期性变化规律。3.2各组大鼠血清性激素水平的比较与正常组比较,模型组大鼠血清FSH、LH、T均明显升高,E2明显降低,组间差异都有统计学显著性（P均＜0.01）。与模型组相比,孕育丹糖浆低剂量组的FSH、LH、T都呈下降趋势,E2呈升高趋势,但数据无明显差异（P均＞0.05）;孕育丹糖浆中剂量组FSH、LH、T均明显下降,E2明显升高,比较结果均有统计学差异（P均＜0.05）;孕育丹糖浆高剂量组及西药组的FSH、LH、T均明显降低,E2明显升高,组间差异都有统计学显著性（P均＜0.01）。孕育丹糖浆高剂量组分别与孕育丹糖浆低剂量组、孕育丹糖浆中剂量组及西药组比较性激素水平,结果显示孕育丹糖浆高剂量组与孕育丹糖浆低剂量组E2、T水平的差异有统计学显著性（P均＜0.05）;其余数据均无明显差异。3.3各组大鼠卵巢组织HE染色结果正常组大鼠卵巢可见不同发育阶段的卵泡和黄体,卵泡内颗粒细胞呈多层。模型组大鼠卵巢呈多囊性改变,黄体数量减少,卵泡内颗粒细胞排列紊乱且层数明显较少。与模型组比较,孕育丹糖浆低、中、高剂量组大鼠卵巢病理性改变轻。其中高剂量组最轻,卵泡内颗粒细胞层形态趋于正常。西药组大鼠卵巢内可见成熟卵泡及黄体,卵泡内颗粒细胞层厚度增加,但排列欠整齐。3.4各组大鼠卵巢组织PI3K、Akt蛋白相对表达水平比较（1）与正常组相比,模型组PI3K、Akt蛋白表达水平明显降低（P＜0.01）,组间差异有统计学显著性。（2）与模型组相比,孕育丹糖浆低剂量组的PI3K蛋白表达水平升高（P＜0.05）,数据有统计学差异;孕育丹糖浆低剂量组的Atk蛋白表达水平有升高趋势,但两组之间的差异无统计学显著性;孕育丹糖浆中剂量组的PI3K、Akt蛋白表达水平均升高（P均＜0.05）,数据均有统计学差异;孕育丹糖浆高剂量组、西药组的PI3K、Akt蛋白表达水平均明显升高（P均＜0.01）,组间差异有显著的统计学意义。（3）孕育丹糖浆高剂量组分别与孕育丹糖浆低剂量组、孕育丹糖浆中剂量组及西药组比较PI3K蛋白的相对表达水平,数据均无明显差异（P均＞0.05）;孕育丹糖浆高剂量组分别与孕育丹糖浆低剂量组、孕育丹糖浆中剂量组及西药组比较Akt蛋白的相对表达水平,实验结果均有统计学意义（P均＜0.05）。3.5各组大鼠卵巢组织PI3K、Akt m RNA相对表达水平比较（1）与正常组相比,模型组大鼠卵巢组织的PI3K、Akt m RNA表达水平明显降低（P＜0.01）,组间差异有统计学显著性;（2）与模型组相比,孕育丹糖浆各剂量组、西药组大鼠卵巢组织的PI3K、Akt m RNA表达水平均明显升高（P＜0.01）,数据均有统计学显著性差异。（3）孕育丹糖浆高剂量组分别与孕育丹糖浆低剂量组、孕育丹糖浆中剂量组及西药组比较PI3K m RNA和Akt m RNA的相对表达水平,结果显示:孕育丹糖浆低剂量组与孕育丹糖浆高剂量组的组间差异有统计学显著性（P＜0.01）;孕育丹糖浆中剂量组与孕育丹糖浆高剂量组的数据比较结果无明显差异（P＞0.05）;西药组与孕育丹糖浆高剂量组的组间差异有统计学显著性。4结论4.1相对于单用西药促排卵治疗,孕育丹糖浆联合西药可以更加明显地改善肾阳虚型PCOS不孕症患者的中医证候积分及性激素水平,促进患者排卵从而提高妊娠率,临床疗效更佳。4.2以温补肾阳为主组方的孕育丹糖浆可明显改善PCOS大鼠卵巢组织的病理变化,使颗粒细胞层增殖,为卵泡的发育及卵子的排出提供物质基础。4.3孕育丹糖浆治疗PCOS的可能机制:激活PI3K/Akt信号通路,提高PI3K、Akt蛋白及m RNA的表达水平,且随着中药剂量的增加,其表达水平逐渐增强,从而促进颗粒细胞层的增殖,改善卵巢组织的病理状态及机体的性激素水平,最终达到排卵甚至妊娠的目的。