研究背景:失重或模拟失重条件下,人或大鼠的骨骼肌会出现明显的废用性肌萎缩。中医学认为,脾司运化、主肌肉,为气血生化之源;若脾虚失运,则脏腑、肌肉无以充养,故肌肉萎缩应属于“脾气虚”之象。已有研究表明,在失重或模拟失重条件下,机体会出现不同程度的“脾气虚”症象,补脾益气中药复方(主要成份:党参、白术、茯苓等)能减轻废用条件下引起的动物及人体“脾气虚”的症象。本课题组的前期研究亦发现,脾虚证小鼠的比目鱼肌明显萎缩,且出现Ⅰ型肌纤维向Ⅱ型肌纤维的转化。因此失重性肌萎缩与脾虚证之间可能存在内在关系,有关这方面的研究已经引起关注。本实验根据中医“脾主肌肉”理论和本领域的相关研究结果,对模拟失重大鼠与脾虚大鼠进行了比较研究,旨在为失重性肌萎缩的“辩证”研究提供科学资料,亦可望为失重性肌萎缩的药物防治提供新思路。研究目的:采用大鼠尾部悬吊法建立模拟失重动物模型,选用耗气破气加饮食失节法建立大鼠脾虚模型,观测一般体征、脏器指数和消化吸收指标的变化;选用健脾益气的四君子汤作为以药反证方剂,观察不同浓度四君子汤对尾部悬吊大鼠比目鱼肌肌萎缩及肌纤维类型的影响。研究方法:(1)以大鼠尾部悬吊建立模拟失重动物模型,以耗气破气加饮食失节法建立脾虚模型;实验动物分为三组,即同步饲养组、脾虚组、尾部悬吊组;实验观察了动物的一般体征、脏器指数和消化吸收功能的变化,测定的指标有:体重、体温、肝脏指数、脾脏指数、胸腺指数、血清D-木糖含量、血清淀粉酶活性。(2)药物反证:运用健脾益气的四君子汤灌饲尾部悬吊大鼠,观测其对尾部悬吊大鼠多项生理指标的影响;实验动物分五组,即同步饲养组、尾吊灌溶媒组、四君子汤高、中、低浓度组;测定的指标有:体重、体温、脏器指数、比目鱼际亍⒓≈靥逯乇?比目鱼肌(soleus,SOL)肌球蛋白重链(myosin heavy chain,MHC)表达水平以及肌萎缩的变化。实验结果:(1)模拟失重大鼠一般体征的变化脾虚组大鼠出现毛枯、尾色淡白、精神萎靡、眯眼、喜扎堆、便稀或便软不成形等典型的脾虚症状。大鼠尾部悬吊后出现眯眼、少动、消瘦、被毛散乱耸立无光泽等外观变化,这些表现和变化与脾虚证大鼠的症状相似,但不具有便稀或便软不成形的典型脾虚症状。(2)模拟失重大鼠多项指标的变化1)体重和体温的变化:大鼠尾部悬吊14天后,与同步饲养组相比,体重、体温均明显降低(P＜0.001,P＜0.01):与脾虚组相比无显著差异(P＞0.05)。2)脏器指数的变化:大鼠尾部悬吊14天后,与同步饲养组相比,肝脏指数、脾脏指数、胸腺指数均降低(P＜0.01,P＜0.01,P＜0.05);与脾虚组相比无显著差异(P＞0.05)。3)血清D-木糖含量和血清淀粉酶活性的变化:大鼠尾部悬吊14天后,与同步饲养组相比,血清D-木糖含量、血清淀粉酶活性均显著降低(P＜0.01,P＜0.001);且以上指标与脾虚组相比无显著差异(P＞0.05)。(3)药物反证1)体重和体温的变化:与同步饲养组相比,尾部悬吊大鼠体重、体温均降低(P＜0.01,P＞0.05);且四君子汤中浓度组大鼠的体重与同步饲养组相比无显著差异(P＞0.05)。2)脏器指数的变化:与同步饲养组相比,尾部悬吊大鼠肝脏指数、脾脏指数、胸腺指数均降低(P＜0.01,P＜0.001,P＞0.05);且四君子汤高浓度组大鼠的肝脏指数,中浓度组大鼠的肝脏指数与脾脏指数与同步饲养组相比无显著差异(P＞0.05)。3)比目鱼肌湿重、肌重体重比的变化:与同步饲养组相比,尾部悬吊大鼠的比目鱼肌湿重、肌重体重比均明显降低(P＜0.01,P＜0.01);且四君子汤高、中浓度组大鼠的比目鱼肌湿重和肌重体重比与同步饲养组相比无显著差异(P＞0.05)。4)比目鱼肌肌纤维比例和面积的变化;与同步饲养组相比,尾部悬吊大鼠的比目鱼肌Ⅰ型肌纤维比例和面积、Ⅱ型肌纤维面积均显著降低(P＜0.001):且四君子汤中浓度组大鼠比目鱼肌的Ⅰ型肌纤维比例、中浓度组Ⅱ型肌纤维面积与同步饲养组相比无显著差异(P＞0.05)。实验结论:(1)尾部悬吊大鼠出现的一系列类似脾虚证的表现与人体脾虚证常见地临床表现及脾虚大鼠的表现相似。尾部悬吊组大鼠的脏器指数与脾虚组大鼠的脏器指数相比无差异。(2)尾部悬吊大鼠的消化吸收指标(血清D-木糖含量和血清淀粉酶活性)与脾虚组大鼠相比无差异,与临床脾虚证患者变化趋势一致。(3)在药物反证方面,四君子汤作为健脾益气方剂,对模拟失重大鼠的多项生理指标有一定改善作用。