羊膜匀浆液对兔小梁切除术后滤过泡及TGFβ1、CTGF表达的影响

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目的:研究羊膜匀浆提取液在兔实验性小梁切除术后对滤过泡及转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGFβ)、结缔组织生长因子(connectivetissue growth factor,CTGF)表达的影响,观察羊膜匀浆液对青光眼滤过术后抗瘢痕形成的应用价值。方法:30只健康成年新西兰大白兔,雌雄兼并,随机平均分为实验组和对照组,每组15只兔,15眼。均选右眼行标准小梁切除术。实验组于术后当天开始用羊膜匀浆液和氯霉素滴眼液点眼,每天四次,对照组单纯用氯霉素滴眼液点眼,每天四次。分别于术后第2d、5d、10d、14d裂隙灯下观察术眼滤过泡形态、并发症及眼压变化。于术后5d、10d、14d每组随机取5只兔子处死,摘除眼球,取手术眼的滤过泡及其周围角巩膜组织,用中性福尔马林溶液固定,行HE染色和免疫组织化学染色。光镜下观察滤过道瘢痕形成、成纤维细胞的增殖以及TGFβ1、CTGF的阳性表达情况。结果:1)眼压:术前与术后2d两组眼压差异无统计学意义(P>0.05);术后第5d、10d、14d对照组眼压高于实验组,有显著性差异(P<0.05)。2)滤过泡:共22眼形成功能性滤过泡,其中实验组14眼,对照组8眼(p<0.05)。术后2天两组滤过泡均为功能性滤过泡;术后14d对照组滤过泡大部分消失,而实验组滤过泡隆起、弥散,大部分为功能性滤过泡,仅1眼为非功能性滤过泡。实验组较对照组功能性滤过泡形成率高(P<0.05)。3)并发症:各时间点两组均未发现角膜水肿、浅前房、结膜伤口漏、视网膜脱离、黄斑水肿等并发症。4)病理切片常规HE染色观察结果:术后第5d两组滤过道均通畅;10d时对照组滤过道部分胶原纤维增生,滤过泡趋于消失;14d时大部分滤过泡消失。实验组第14d时,滤过道部分被疏松的胶原纤维所替代,滤过道通畅。光镜下实验组术后14d时滤过道成纤维细胞(fibroblast,Fb)数低于对照组(P<0.05)。5)免疫组织化学染色结果:TGFβ1、CTGF均在术后5d时表达阳性率最高,染色呈深黄色,并随时间延长,表达逐渐降低;实验组表达低于对照组,两组比较差异有显著性(P<0.05)。结论1)羊膜匀浆上清液点眼无并发症发生,能够有效的降低眼压;2)羊膜匀浆上清液点眼,可以抑制术后成纤维细胞的增殖,增强滤过泡滤过功能,提高滤过手术成功率;3)结果提示局部应用羊膜匀浆液点眼对手术区滤过道TGFβ1、CTGF表达有抑制作用。
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