脂肪酶(EC3.1.1.3)是工业应用中最重要也是最有希望的生物催化剂。该研究中,为了实现Y.lipolytica解脂耶氏酵母脂肪酶基因在毕赤酵母的高水平表达,我们通过从头设计和合成对LIP2的密码子进行优化,优化后的基因相对于天然lip2脂肪酶的表达有显著提高。我们还比较分析了启动子类型(PAOX1和PFLD1)和毕赤酵母表达系统,包括新开发的PichiaPink系统的影响,获得脂肪酶的生产能力最优的重组工程菌。台式发酵罐发酵的研究结果表明,该重组子在启动子PAOX1的控制下,经密码子优化的脂肪酶基因syn-lip在发酵罐中比其他类型的重组体脂肪酶生产能力有显著提高。在发酵培养基中经甲醇诱导表达96h,对发酵液中毕赤酵母的细胞鲜重,脂肪酶的活性和的蛋白质含量进行了测定,分别是细胞鲜重最高为262g/L,酶活达到38,500 U/ml和蛋白含量达到2.82g/L,均为其最高值。这项研究中,我们所使用的基因合成策略,不同启动子和不同世代毕赤酵母表达系统之间的比较分析,不仅极大地促进了脂肪酶在工业领域的生物应用,也将作为未来这个领域研究工作的参考。