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目的探讨Elf5在TGF-β诱导的前列腺癌上皮间质转化的相关机制。方法收集并纳入124例前列腺癌病理样本,通过免疫组化染色(IHC)和ImageJ软件分析Elf5与E-钙粘蛋白和N-钙粘蛋白表达的关系。在几种常见前列腺癌细胞系中Western Blot检测Elf5的表达,在LNCaP细胞中用siRNA瞬时转染将Elf5沉默使其低表达,在22Rv1细胞中通过HA-Elf5转染将Elf5稳定地高表达;在有/无TGF-β处理的情况下,分组观察LNCaP和22Rv1细胞的形态学变化,同时Western Blot检测这些分组之间E-钙粘蛋白以及反映EMT的生物标志物如N-钙粘蛋白、Snail1、Snail2和ZEB1表达量的变化。对LNCa P和22Rv1细胞进行球形成实验和迁移实验观察其锚定-非依赖生长和迁移侵袭能力是否增加。用荧光素酶报告基因实验(Luciferase)将CAGA12或PAI-1报告基因质粒分别在HEK293和22Rv1细胞中和HA-Elf5共转染,在LNCaP细胞中和siElf5共转染,然后用TGF-β处理并测定荧光素酶活性来判断Elf5是否调节TGF-β信号转导。在LNCaP细胞中检测内源性p-SMAD2、SMAD2、p-SMAD3、SMAD3和Elf5的表达并在22Rv1细胞中验证。在无内源性表达Elf5和SMADs的HEK293细胞中分组共转染HA-Elf5质粒及Flag标记的vector、SMAD2、SMAD3或SMAD4质粒,免疫共沉淀判断Elf5是否与SMADs结合,并在内源性表达Elf5和SMADs的LNCaP细胞中进一步验证。最后,对原发前列腺癌病理样本进行p-SMAD3和TGF-β染色,分析p-SMAD3阳性率,并对Elf5和p-SMAD3与疾病进展结果之间进行生存分析。结果对124例人前列腺癌成组匹配免疫组化染色发现,Elf5可使E-钙粘蛋白表达上调,而使N-钙粘蛋白表达下调,初步提示前列腺癌组织中Elf5可能抑制EMT的发生。Elf5在LNCaP细胞高表达,在22Rv1细胞低表达;在LNCa P和22Rv1细胞中,Elf5与TGF-β对细胞形态影响呈负相关,沉默Elf5和/或用TGF-β处理可使细胞丧失极性,EMT标志物表达增加,从而使其具有更强的转移侵袭能力;且可以促进细胞的球形成能力和迁移能力,使其多向分化能力和恶性迁移能力增加。Elf5和TGF-β对EMT的作用呈负相关,Elf5可以抑制TGF-β驱动的前列腺癌上皮间质转化。在HEK293、LNCaP和22Rv1中,Elf5均可以抑制CAGA12和PAI-1报告基因荧光素酶活性,提示Elf5可以抑制TGF-β信号通路;在LNCaP细胞中Western Blot结果显示沉默Elf5可以促进SMAD3的磷酸化,而22Rv1细胞中过表达Elf5则可以抑制SMAD3磷酸化;在HEK293和LNCaP细胞中,免疫共沉淀结果均显示Elf5可以与SMAD3结合。p-SMAD3在Elf5-/TGF-βhigh前列腺癌样本中表达显著增高,Elf5缺失与TGF-β阳性的前列腺癌病人的无转移生存(MFS)有统计学意义,p-SMAD3表达水平与无转移生存(MFS)有显著统计学意义,表明了Elf5缺失可致TGF-β阳性前列腺癌病人转移增加,Elf5联合TGF-β的状态可能作为前列腺癌转移的标志物。结论Elf5与EMT呈负相关,其通过与SMAD3结合抑制其磷酸化进而抑制TGF-β驱动的前列腺癌EMT,Elf5可能作为TGF-β阳性前列腺癌患者无转移生存的预后标志物。