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本研究利用显微外科技术制作建立大鼠回肠贮袋模型,随后采用葡聚糖硫酸钠(Dextran surfate sodium,DSS)诱导大鼠回肠贮袋炎模型,通过对比DSS干预前后大鼠粪便评分、组织病理学的变化和贮袋(或末端回场)组织中炎症标志物IL-1β、IL-6、TNF-α和IL-10的mRNA转录水平评估贮袋炎模型。大鼠贮袋炎模型成功建立后给予嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus,LA)灌胃治疗,通过对比大鼠粪便评分、评价贮袋组织病理改变、实时荧光定量PCR技术检测上述炎症标志物相对表达量变化及免疫组化检测肠粘膜紧密连接蛋白ZO-1的表达水平综合评价治疗大鼠回肠贮袋炎的效果并探讨其机制。第一部分大鼠回肠贮袋炎模型的建立目的:利用显微外科技术建立大鼠回肠贮袋模型,并采用葡聚糖硫酸钠(dextran sulphate sodium salt,DSS)诱导大鼠回肠贮袋炎模型。方法:利用显微外科技术建立SD大鼠回肠贮袋模型,将模型大鼠随机分为回肠贮袋肛管吻合术(ileal pouch-anal anastomosis,IPAA)组,IPAA+DSS组:IPAA术后第31天开始,连续给4%DSS溶液100ml 4天,并设定假手术(Sham)组:开关腹为对照组。实验期间记录各组大鼠体重变化、便血情况、粪便性状(评分);术后第35天取对照组末端回肠组织,IPAA大鼠取回肠贮袋组织,HE染色进行组织学评分;实时荧光定量PCR检测组织IL-1β、IL-6、IL-10和TNF-α的mRNA表达水平。结果:IPAA术后大鼠体重在(9.42±1.44)天达到最低水平(285.47±10.30)g之后逐渐增长;给予DSS后大鼠体重出现持续下降,下降幅度为(72.92±6.60)g。IPAA+DSS组大鼠均出现血便(6/6),粪便评分低于IPAA组和Sham组(F=350.4,P<0.05);给予DSS后大鼠的贮袋组织学评分高于Sham组和IPAA组(F=573.8,P<0.05),且IPAA组贮袋评分高于Sham组末端回肠组织评分(t=20.55,P<0.05)。IPAA+DSS组贮袋组织中IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA转录水平均高于Sham组和IPAA组(F=886.4,P<0.05;F=773.1,P<0.05;F=575.2,P<0.05),IL-10mRNA表达水平低于后两组(F=536.3,P<0.05)。IPAA组贮袋组织中IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA转录水平高于Sham组(t=16.47,P<0.05;t=8.29,P<0.05;t=16.05,P<0.05),IL-10mRNA表达水平低于Sham组(t=14.24,P<0.05)。结论:在建立大鼠回肠贮袋模型基础上给予适量DSS可以建立理想的大鼠回肠贮袋炎模型。第二部分嗜酸乳杆菌干预大鼠回肠贮袋炎模型的实验研究目的:评价嗜酸乳杆菌干预大鼠回肠贮袋炎模型的治疗效果并探讨其作用机制。方法:利用显微外科技术建立SD大鼠回肠贮袋模型,并建立DSS诱导的回肠贮袋炎模型,将模型大鼠随机分为生理盐水组(NS组)、嗜酸乳杆菌组(LA组)和无干预组(non-intervention,NI组),各组分别给予3ml生理盐水灌胃、1×1010 CFU(3ml)嗜酸乳杆菌灌胃和无干预7天。实验期间观察记录各组大鼠体重变化、便血情况、粪便性状(评分);取大鼠回肠贮袋组织,HE染色进行组织学评分;实时荧光定量PCR检测贮袋组织中IL-1β、IL-6、IL-10、TNF-α的mRNA表达水平;免疫组化检测贮袋组织紧密连接蛋白ZO-1表达水平。结果:干预结束后LA组体重恢复水平高于NS组和NI组,差异有统计学意义(F=61.34,P<0.05)。各组大鼠均出现血便,在DSS处理结束后LA组大鼠在3.17±0.75天血便消失,NS组和NI组分别为6.5±0.55天和6.17±0.75天。LA组大鼠粪便性状明显改善,粪便评分高于NS组和NI组(F=108.7,P<0.05)。NS组和NI组大鼠回肠贮袋组织病理评分高于LA组,差异有统计学意义(F=31.23,P<0.05)。LA组贮袋组织中IL-1β、IL-6和TNF-α的mRNA转录水平均低于NS组和NI组(F=373.6,P<0.05;F=285.5,P<0.05;F=132.9,P<0.05),IL-10mRNA表达水平高于后两组(F=61.05,P<0.05)。LA组贮袋组织中ZO-1表达水平高于NS组和NI组(F=8.23,P<0.05),NS组和NI组贮袋组织各炎症因子和ZO-1表达差异无统计学差异(均P>0.05)。结论:嗜酸乳杆菌可以治疗DSS诱导的大鼠回肠贮袋炎,其可能是通过抑制IL-1β、IL-6和TNF-α,促进IL-10的表达减轻贮袋炎症,并影响ZO-1蛋白表达改善肠道屏障功能。