山茶叶部微生物区系与灰斑病发生关系的研究

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山茶灰斑病是山茶花常发病害之一,常造成叶、梢干枯,轻者影响植株观赏价值,重则导致整株衰弱死亡。因此,该病已成为当前山茶花生产发展的一个重要问题。目前,关于各种植物微生物区系的研究很多,但却鲜见有关山茶微生物区系的研究报导。本文以山茶叶部为研究对象,探索叶片灰斑病发生与叶部微生态环境的关系,为采用微生态调控措施防治山茶灰斑病提供基础资料。主要研究结果如下:1.山茶叶部微生物区系主要由细菌、真菌、放线菌三大类群组成。栖居于健叶的三大类微生物类群的数量大于病叶。在叶面附生微生物中,以细菌最多,真菌次之,放线菌最少;在叶片内生微生物中,以真菌数量最多,细菌次之,放线菌最少。2.以形态特征为主借助分子生物学手段,鉴定得到叶面附生细菌38属70种,真菌27属45种,放线菌2属4种;叶片内生细菌18属28种,真菌18属23种,放线菌1种,并发现健、病叶间优势微生物类群有明显差异。在健叶叶面附生微生物的数量组成中起重要作用并且表现稳定的优势菌有:Bacillus cereus、Cladosporium cladosporioides、Streptomyces griseus和Streptomyces mediolani;病叶叶面为:Stenotrophomonasmaltophilia、Pestalotiopsis guepini和Streptomyces microflavus。在健叶内生微生物的数量中居于优势地位且表现稳定的类群是:Bacillus subtilis、Bacillus thuringiensis、Bacillusamyloliquefaciens、Botryosphaeria dothidea和Guignardia camelliae等;而病叶中优势类群为B.amyloliquefaciens、B.cereus、B.subtilis、G.camelliae和P.guepini。3.季节变化对叶面附生细菌数量和物种丰富度影响显著;但对真菌、放线菌的作用较小。细菌数量和物种丰富度都在夏季达到活性高峰,春、冬季节活性较低。叶片感病与否是影响叶面附生以及叶片内生真菌数量和物种丰富度的重要因素,对叶面附生放线菌数量也有显著影响,但对细菌作用较小。健、病叶间真菌数量和物种丰富度的差异通常在夏、秋季表现最为明显。4.通过平板对峙法从叶部微生物类群中筛选到对山茶灰斑病菌具有强拮抗性的细菌4株,分别是Bacillus amyloliquefaciens、Bacillus subtilis、Delftia acidovorans、Pseudomonasfluorescens;放线菌4株,分别为Streptomyces californicus、Streptomyce griseus、Streptomyces mediolani和Streptomyces microflavus,它们与病原菌的拮抗带宽度都在0.5cm以上;真菌3株,分别Phoma exigua、Botryotinia fuckeliana和Didymella bryoniae,Phoma exigua与病原菌之间产生拮抗带宽度为0.7cm,其余两种通过营养竞争的方式抑制病原菌生长,抑菌率在50%以上。5.叶部真菌群落的多样性与均匀性与山茶花灰斑病病情指数存在负相关性。在春、冬季真菌群落的多样性和均匀性程度较高,而病情指数较小;在夏、秋季真菌群落多样性和均匀性较小时,病情指数却呈现较高状态。各优势微生物与病原菌Pestalotiopsisguepini之间存在一定相关性。放线菌Streptomyces mediolani和真菌Botryosphaeriadothidea与P.guepini在数量上呈显著负相关,Guignardia camelliae与P.guepini呈极显著正相关。
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