Met和Kr-h1基因在中华绒螯蟹卵巢发育中的作用研究

来源 :安徽农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:asdf303
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)是我国十分重要的淡水养殖品种,然而在河蟹的养殖过程中出现了普遍发生一龄蟹性早熟现象,严重影响了河蟹养殖效益的提高和河蟹产业的健康发展。因此,如何利用内分泌调控手段从根本上控制河蟹的性腺异常发育问题,已成为河蟹养殖过程中亟需解决的重大问题之一。甲基法尼酯(Methyl farnesoate,MF)是一类重要的类倍半萜类激素,具有促进甲壳动物卵巢成熟与性腺发育的作用。Met(Methoprene-tolerant)和Kr-h1(Krüppel-homolog 1)作为重要的转录因子参与了MF介导的信号转导通路调控甲壳动物卵巢发育。本研究旨在探究中华绒螯蟹Met和Kr-h1基因在MF介导的卵巢发育过程中的作用,综合利用RACE技术克隆了中华绒螯蟹Es-Met和Es-Kr-h1基因的c DNA全长序列、q PCR技术检测基因的相对表达量、GC/MS方法检测血淋巴中MF滴度、离体组织培养、活体注射MF、眼柄消融等实验手段分析了MF对中华绒螯蟹Es-Met、Es-Kr-h1和Es-Vg(Vitellogenin)基因表达量的影响,主要结果如下:1.克隆得到中华绒螯蟹Es-Met和Es-Kr-h1基因全长为3383 bp和1686 bp分别编码996和354个氨基酸,结果分析显示中华绒螯蟹Es-Met氨基酸序列中含有b HLH、PAS-A和PAS-B三个保守结构域,属于b HLH-PAS转录因子家族;Es-Kr-h1氨基酸序列中含有七个保守的锌指基序(Zn2-Zn8),属于Krüppel-like factors(KLFs)转录因子家族。2.组织表达谱结果表明:中华绒螯蟹Es-Met和Es-Kr-h1基因均在肝胰腺组织中表达量最高。q PCR和GC/MS检测结果显示:在卵巢发育过程中,中华绒螯蟹肝胰腺中Es-Met、Es-Kr-h1和Es-Vg基因的表达量与血淋巴MF滴度之间呈极强的正相关性,且Es-Met和Es-Kr-h1表达量变化趋势完全一致;而与肝胰腺组织相比,卵巢组织中Es-Met、Es-Kr-h1和Es-Vg基因表达量一直处于较低水平,且在整个发育期内无显著变化,与血淋巴中MF滴度也不成明显的相关性。3.离体组织培养结果表明中华绒螯蟹肝胰腺组织中的Es-Met、Es-Kr-h1及Es-Vg基因表达量可在较高浓度的MF添加量下被同步显著上调,但在卵巢组织中无显著变化;活体注射外源MF后发现肝胰腺组织中的Es-Met、Es-Kr-h1及Es-Vg基因表达量也均可在MF注射后被同步显著上调,但在卵巢组织中均无显著变化;眼柄消融后发现,试验组河蟹在去眼柄后的第3天、5天和7天,中华绒螯蟹肝胰腺组织中的Es-Met、Es-Kr-h1及Es-Vg基因表达量被同步显著性上调,而在卵巢组织中并无显著性变化。综上所述,中华绒螯蟹Es-Met基因与下游转录因子Es-Kr-h1可能参与了由MF介导的中华绒螯蟹外源性卵黄发生和卵巢发育过程,本研究有助于揭示甲壳动物中Met和Kr-h1在JH/MF-Met-Kr-h1信号通路中调控中华绒螯蟹的卵黄发生和卵巢发育的分子机制,为通过内分泌调控措施解决河蟹养殖上的性早熟问题提供理论基础。
其他文献
猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)是引起的一种急性和高度传染性肠道疾病。PEDV感染所有年龄段的猪,引起呕吐和腹泻等症状。PEDV在感染成年猪时仅产生消瘦等轻微症状,而在感染新生仔猪时表现出近100%的死亡率。该病于1971年首次在英国报道以来,到目前为止仍在多个
学位
21世纪经济社会高速发展,传统能源、绿色能源在人类社会中的需求和使用量都越来越高,如何在满足社区用户正常用电的同时,提高社区用电效率、提升社区分布式能源的使用频率、增加社区的整体利益,成了本文主要的研究对象。社区作为建筑的集群形式,其能耗自然是人们重点研究的对象。本文在智慧社区的基础上,对能源交易模式进行了研究并对能源管理对象和能源管理方式展开了讨论。首先,本文探究了智慧社区能源交易模式,介绍了社
恒定链(Invariant chain,Ii)具有重要的免疫调节作用,其在细胞内的定位与功能密切相关,如在内吞体中,Ii对抗原及其转运分子的加工和递呈具有重要作用。Rab5a和Rab7b分别是不同时期内吞体间的主要转运蛋白。课题组前期研究发现二者均可以在内吞体中与Ii共定位和结合,然而Ii与它们结合和共定位的功能结构域尚不清楚。为此,本实验以鸡Ii为研究对象,主要进行了以下两个方面的研究。第一,明
学位
学位
学位
新城疫(Newcastle disease,ND)是由新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)引起的禽类的一种急性、热性、败血性和高度接触性传染病。NDV属于副黏病毒科(Paramyxoviridae),禽腮腺炎病毒属(Avulavirus)的禽副黏病毒Ⅰ型(APMV-Ⅰ),可对多种禽类造成致死性感染。非编码RNA常被认为是基因组“暗物质”,常见的非编码RNA有lnc
学位
学位