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本论文旨在探讨糖尿病肾病（Diabtic kidney disease,DKD）患者白细胞介素2（Interleukin-2,IL-2）及瘦素的相关性;明确DKD中瘦素对IL-2的调控作用和IL-2在DKD肾小管损伤中的作用。1纳入2017年7月-2018年7月在贵州大学医学院附属人民医院肾内科就诊的DKD患者48例和体检门诊的健康受试者24例。收集患者一般资料、血液和尿液样本。分别用细胞因子和肾损伤标志物微阵列检测DKD患者血清中105种炎症因子和尿液中38种肾损伤因子。Spearman相关性分析IL-2与瘦素的相关性。2链脲佐菌素（Streptozocin,STZ）诱导的DKD模型,63只体重约18g的C57小鼠随机分为3组,平均每组21只/组[对照组（Con）、糖尿病肾病组（DKD）和糖尿病肾病+IL-2受体抗体组（DKD+IL-2Ri）]。DKD和DKD+IL-2Ri组小鼠给予高脂高糖饲料喂养8周后,予以腹腔注射50 mg/kg STZ;Con组小鼠常规饲料喂养,腹腔注射等体积的柠檬酸盐缓冲液（STZ溶剂）。随机血糖≥16.7 mmol/L判定为2型糖尿病（Type 2 diabetes mellitus,T2DM）造模成功。DKD+IL-2Ri组腹腔注射50μg IL-2受体抗体,每7天注射1次,共4次。瘦素抵抗小鼠模型:5周龄瘦素长型受体基因突变C57BLKS小鼠（Leprdb鼠）63只和同窝野生型小鼠21只（WT鼠）,将Leprdb鼠分为3组,每组21只,Leprdb、Leprdb+ins、Leprdb+IL-2组。Leprdb+ins组小鼠给予1-5U/24h皮下注射胰岛素,以将空腹血糖控制在<7.8 mmol/L。Leprdb+IL-2Ri组腹腔注射50μg IL-2受体抗体,7天注射1次,共4次。在8周、12周和16周龄时收集各组小鼠血液、尿液和肾组织。生化试剂盒检测血糖、血尿素、尿肌酐、尿糖、尿蛋白。苏木素-伊红（Hem atoxylin-eosin,HE）染色、高碘酸希夫氏（Periodic acid-Schiff,PAS）染色、马松（Massion）三色染色和天狼心红（Sirius Red,SR）染色检测肾脏病理改变。免疫组织化学、原位杂交检测肾组织CD68、F4/80、E-钙黏蛋白和α平滑肌肉肌动蛋白（α-smooth muscle actin,α-SMA）的m RNA和蛋白质。IL-2阳性细胞百分比用流式细胞术检测。3NRK-52E细胞常规培养于含有5%的胎牛血清和1%的链霉素青霉素混合液的高糖DMEM培养基,培养条件为37℃、5%CO2、95%湿度。分别向NRK-52E中加入25、50、100、150和200 ng/ml重组瘦素处理48 h和72 h,以确定瘦素的作用浓度。向NRK-52E中加入50 ng/ml瘦素处理24、48、72和96h,以确定瘦素作用时间。将NRK-52E细胞分为4组,对照组培养于DMEM培养基、瘦素组加入150 ng/ml的瘦素处理、受体拮抗组用25μmol的瘦素受体拮抗剂和瘦素+受体拮抗组分别于48h和72h后收集细胞和清,分别用q PCR检测IL-2的m RNA和ELISA检测蛋白表达,Western blotting检测p65、STAT3和p STAT3的蛋白表达情况。4分子对接预测瘦素在肾小管上皮细胞表面可能的受体分子及其结合位点。1与健康人群相比,DKD患者血清中的IL-2和瘦素表达水平明显增加,且二者呈正相关性。2与相应的对照组相比,STZ诱导的DKD和瘦素抵抗小鼠血糖和尿糖增高,IL-2不能降低两种小鼠的血糖和尿葡萄糖,胰岛素能降低leprd bdb小鼠血糖和尿葡萄糖。两种小鼠模型的各组之间肾脏体重比无统计学异。与相应的对照组相比,两种小鼠模型各时期尿素增高,给予IL-2受体抗体后,在12周和6周均能够降低尿素。两种小鼠模型各时期24h尿蛋白都明显增高,给予IL-2受体抗体后,在12周和16周时能降低24h蛋白尿,但胰岛素干预后8周和12周降低蛋白尿。STZ诱导的DKD分别在12周和16周尿蛋白肌酐比在增加,可被IL-2受体抑制剂降低;而瘦素抵抗小鼠16周增高,可以被胰岛素和阻断IL-2受体降低。肾脏病理显示,两种小鼠模型各时期都发生肾小球扩张张、系膜基质扩增、肾小管肿胀和肾小管上皮脱落等病理改变;各时期胰岛素和阻断IL-2受体均能改善肾组织病理变化。STZ诱导的DKD小鼠各时期系膜指数明显增加,给予IL-2受体受体抗体后明显降低,而瘦素抵抗小鼠各组之间其系膜指数差异无统计学意义。STZ诱导的DKD小鼠肾小球面积在12周和16周明显增大,在12周被IL-2受体受体抗体降低。瘦素抵抗小鼠所有时期肾小球面积均增加,但在8周和12周被胰岛降低,阻断IL-2受体对其影响不明显。马松染色和天狼心红染色结果显示,两种小鼠模型各个时期肾小球周围和小管间质均可见明显的纤维胶原增加,胰岛素干预和IL-2受体阻断后均有明显改善。但胶原纤维定量分析显示STZ诱导DKD中只有16周时胶原纤维的增加具有统计学意义,且IL-2阻断后可以降低纤维胶原;而瘦素抵抗小鼠中,12周和16周纤维胶原明显增加,胰岛素干预不降低胶原纤维,阻断IL-2可以降低胶原纤维。两个小鼠模型各时期纤维化标志E-钙黏蛋白的表达均明显降低,且胰岛素干预和阻断IL-2阻断IL-2受体后对其表达无明显影响;两个小鼠模型各时期α-SMA蛋白均明显增加,但给予胰岛素干预和阻断IL-2受体,12周和16周对能下调其表达。HE染色结果显示,在STZ诱导的DKD各个时期肾组织有核细胞数明显增加,各时期有核细胞数明显增加,16周时IL-2干预后降低。8周和12周瘦素抵抗小鼠肾组织有核细胞数明显增加,胰岛素干预和阻断IL-2对其影响不明显。两个模型各时期肾组织中CD68+细胞数明显增加,两个小鼠模型中阻断IL-2受体能使其降低,胰岛素对CD68+细胞数无明显影响。两种小鼠模型中,各时期F4/80+细胞数均增加,IL-2受体阻断对STZ诱导的DKD肾组织F4/80+细胞数影响不明显,但能降低瘦素抵抗小鼠肾组织的F4/80+细胞数,胰岛素干预后对其影响不明显。3与对照组相比,瘦素和瘦素+受体拮抗剂组NRK细胞分泌IL-2表达上调;与瘦素处理的NRK-52E细胞相比,瘦素+受体拮抗组NRK-52E细胞IL-2表达无明显差异。瘦素受体下游蛋白分子STAT3、p STAT3和p65在对照组和瘦素组表达无差异,但在给予瘦素受体拮抗剂后p STAT3和p65的表达明显低于瘦素组和对照组。4获得8个抗原肽、11个MHC-I抗原肽和4个MHC-II抗原肽,分子对接分析获得其4个抗原肽与TLR2紧密结合。DKD患者的瘦素和IL-2的表达具有相关性,DKD小鼠瘦素上调IL-2的表达,IL-2参与DKD的肾小管损伤。