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目的:研究化瘀通络灸治疗VD大鼠三疗程中星形胶质细胞GFAP的表达特点及缝隙连接蛋白CX43的表达,分析化瘀通络灸治疗VD大鼠对星形胶质细胞的影响及与缝隙连接的相关性。方法:实验一:将实验的SPF级大鼠剔除在水迷宫中原地旋转、漂浮静止的,然后采用随机列表法将实验鼠分为假手术组、造模组两组。假手术组只分离颈总动脉,不做其他处理;造模组采用实验组改良的二血管阻断法(two vessel occlusion,2-VO)建立大鼠模型。然后将通过水迷宫实验鉴定确定造模成功的大鼠随机分为3组:模型组、艾灸组、西药组,每组大鼠常规饲养7天后开始不同的治疗处理。模型组、假手术组:大鼠继续常规饲养,不做任何处理;艾灸组:对大鼠“大椎”、“百会”、“神庭”进行悬灸,每穴20分钟,每7天为一疗程,共艾灸3个疗程;西药组:与艾灸组相同时间段给予西药组大鼠西药吡拉西坦灌胃,剂量根据“人与动物等效剂量比率表”确定。治疗完成后,将各组水迷宫实验结果进行评估,分析化瘀通络灸对VD大鼠空间记忆能力的影响。实验二:将VD大鼠随机分为假手术组、模型组、艾灸组和西药组,每组根据三个治疗阶段再分为三个亚组:一疗程7天、二疗程14天、三疗程21天。同实验一随机选取假手术组对照,其余同上复制VD大鼠模型,模型成功后根据组别不同采取不同的治疗处理方法,方法与实验一相同。治疗结束24h后取材大鼠脑组织。通过HE染色观察VD大鼠病理形态的改变;通过免疫组化和Western blot方法检测VD大鼠海马星形胶质细胞GFAP蛋白的表达,探究化瘀通络灸治疗VD大鼠的作用机制是否与星形胶质细胞有关。实验三:分组、取材同实验二。Western blot检测VD大鼠缝隙连接蛋白中CX43的表达;统计学数据分析方法进行GFAP与CX43表达的相关性研究。探究化瘀通络灸治疗VD大鼠对星形胶质细胞的影响与缝隙连接的相关性。统计分析:本次实验研究使用软件SPSS 23.0进行数据统计学分析,计量资料采用均数±标准差(?)表示。满足正态分布和方差齐性检验的数据,两组之间组间比较采用方差分析,多重比较则采用SNK、LSD分析;不符合正态分布以及方差齐性的数据,使用秩和检验进行分析。相关性进行分析采用Pearson多元相关性进行分析,相关系数为R。设定P<0.05有统计学意义,P<0.01表示具有显著统计学意义,P>0.05则无统计学意义。结果:(1)VD大鼠空间记忆能力的影响:水迷宫实验第五天,统计大鼠潜伏期和穿越平台次数。与假手术组相比,模型组大鼠耗时更长、次数更少;相比于模型组,艾灸组、西药组大鼠时间减少、次数增多,同时艾灸组比西药组作用更明显;与治疗前相比,艾灸组和西药组大鼠耗时减少、次数增多。差异均具有统计学意义(P<0.05)。(2)VD大鼠星形胶质细胞GFAP表达的影响:模型组表达高于假手术组;经过治疗,西药组、艾灸组大鼠海马GFAP的表达与模型组比较降低,艾灸组低于西药组。差异均具有统计学意义(P<0.05)。(3)VD大鼠海马缝隙连接蛋白CX43的表达及与GFAP的相关性研究:模型组表达高于假手术组;经过治疗,西药、艾灸组CX43的表达与VD模型组相比降低,艾灸组低于西药组。使用统计学软件对比GFAP与CX43的蛋白表达结果,进行相关性分析,结果呈显著正相关。差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:(1)化瘀通络灸疗法对VD大鼠空间记忆能力的改善有明显作用。(2)化瘀通络灸可以通过下调VD大鼠星形胶质细胞的表达促进血管性痴呆进程中脑缺血后的损伤修复。(3)化瘀通络灸治疗VD大鼠对星形胶质细胞表达的影响可能与缝隙连接CX43表达相关。