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肺移植对于严重肺气肿、原发性肺动脉高压等终末期肺病,已经成为一种唯一的治疗方法,但肺缺血再灌注损伤仍然是肺移植患者术后死亡的主要原因之一。如何减轻移植肺的缺血再灌注损伤一直是国内外肺移植研究的重点领域。缺血再灌注的病理生理过程中,各种诱导因素、炎症介质、效应因子等构成复杂的网络,而核因子-κB (nuclear factor kappa B NF-κB)则是这个网络的“焦点”,它能在上游调控炎症,并成为缺血再灌注损伤时炎症调节的枢纽。故我们把NF-κB作为作用的靶点,运用NF-κB的抑制剂吡咯烷二硫代氨甲酸酯(pyrrolidine dithiocarbamate PDTC)干预其过度激活,起到减轻肺缺血再灌注的损伤的作用。课题分为以下两个部分:第一部分:改良三袖套法建立大鼠左肺原位移植动物模型目的探讨建立更简便有效的大鼠原位左肺移植模型。方法将40只SD大鼠随机配对,采用三袖套法进行肺动、静脉的吻合,内支架进行支气管重建,建立大鼠肺移植模型。结果进行大鼠左肺原位移植正式实验20例,供肺灌注到摘取需时(15±3)min,供肺完成体外套管需时(5±2)min,供受体动静脉和支气管套管吻合需时(30±3)min,总手术平均时间(63±4)min。手术成功率90%。血气、病理学等检查证实成功复制了肺移植缺血再灌注模型。结论该方法操作简便,成功率高,经济实用,可用于大鼠肺移植缺血再灌注损伤的实验研究。第二部分:核因子-κB抑制剂PDTC对大鼠肺移植缺血再灌注损伤的保护作用目的通过建立大鼠肺移植缺血再灌注模型,检测缺血再灌注损伤中肺组织中NF-κB、TNF-α及ICAM-1的表达,探讨核因子-κB抑制剂PDTC对大鼠肺移植缺血再灌注损伤的影响及其作用机制。方法实验分3组,即假手术对照组(A组)、空白对照组(B组)和PDTC组(C组),每组8例。空白对照组用4℃LPDG液灌洗并保存4h,PDTC组用含PDTC(40mmol/L)的4℃LPDG液灌洗并保存供肺4h。移植肺再灌注1h后结束实验。测定肺组织湿-干重比、MPO活性,观察移植肺组织病理改变, ELISA测定TNF-α表达水平,免疫组化染色检测ICAM-1及NF-κB表达,RT-PCR检测NF-κB mRNA的水平。结果与空白对照组比较,PDTC组肺组织损伤程度明显减轻,肺组织湿干重比、MPO活性均有下降(P < 0.01)。NF-κB、ICAM-1及TNF-α的表达水平较空白对照组明显减少(P < 0.01)。结论核因子-κB抑制剂PDTC能有效地减轻缺血再灌注损伤,明显改善移植肺功能,其保护作用可能与抑制TNF-α和ICAM-1的表达有关。