【摘 要】
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目的:本实验以草果不同极性部位提取物为研究对象,一方面考察草果不同极性部位提取物对小鼠的免疫调节活性;另一方面,利用体外抗氧化活性实验进行活性追踪,明确草果抗氧化药效物质。方法:（1）采用环磷酰胺法建立免疫低下小鼠模型,通过一般情况观察、体重变化、免疫器官指数、脾脏组织切片、外周血白细胞计数、外周血T淋巴细胞（CD3+）及其亚群CD4+/CD8+细胞、细胞因子IL-2等指标,探讨草果不同极性部位提
【基金项目】
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桂科AB18221095（项目编号）:广西重点研发计划项目；
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目的:本实验以草果不同极性部位提取物为研究对象,一方面考察草果不同极性部位提取物对小鼠的免疫调节活性;另一方面,利用体外抗氧化活性实验进行活性追踪,明确草果抗氧化药效物质。方法:（1）采用环磷酰胺法建立免疫低下小鼠模型,通过一般情况观察、体重变化、免疫器官指数、脾脏组织切片、外周血白细胞计数、外周血T淋巴细胞（CD3+）及其亚群CD4+/CD8+细胞、细胞因子IL-2等指标,探讨草果不同极性部位提取物对小鼠的免疫调节活性;（2）以BHT作为阳性对照,测定草果不同极性部位提取物对DPPH自由基、ABTS自由基、超氧阴离子自由基、羟基自由基的清除能力,以及螯合Fe2+的能力和还原Fe3+能力,筛选出具有抗氧化活性的提取物;（3）运用反复硅胶柱层析、薄层色谱分析和高效液相色谱等,对抗氧化活性组分进行分离纯化,得到活性单体化合物,通过MS、UV、NMR等现代波谱技术和光谱技术对活性单体化合物进行结构鉴定;（4）对活性单体化合物进行清除DPPH、ABTS、超氧阴离子等自由基,螯合Fe2+能力,还原Fe3+能力以及对DNA间接损伤的保护作用实验,探讨抗氧化活性构效关系以及作用机理。结果:（1）免疫调节活性的实验结果表明:草果不同极性部位提取物对小鼠在造模前后的体重并没有产生明显的变化,统计学结果的差异无意义;与CTX模型组相比,草果不同极性部位提取物的中、高剂量组能显著提高小鼠的胸腺指数和脾脏指数（P＜0.05）,在一定程度上对环磷酰胺导致的小鼠脾脏损伤具有一定的保护作用;与CTX模型组相比,草果不同极性部位提取物的中、高剂量组均能显著提高小鼠的白细胞和白细胞介素2的水平（P＜0.05）;相对于CTX模型组,草果不同极性部位提取物对小鼠外周血T淋巴细胞亚群影响不明显,结果均无统计学意义。（2）草果不同极性部位提取物清除DPPH自由基的能力为:乙酸乙酯提取物＞正丁醇提取物＞石油醚提取物＞水提取物;清除超氧阴离子自由基能力大小为:正丁醇提取物＞石油醚提取物＞水提取物＞乙酸乙酯提取物;清除ABTS自由基的能力为:乙酸乙酯提取物＞正丁醇提取物＞水提取物＞石油醚提取物。清除羟基自由基的能力为:正丁醇提取物＞石油醚提取物＞乙酸乙酯提取物＞水提取物;Fe2+的螯合能力大小为:正丁醇提取物＞水提取物＞乙酸乙酯提取物＞石油醚提取物;对Fe3+的还原能力强弱排序为:正丁醇提取物＞乙酸乙酯提取物＞石油醚提取物＞水提取物,但样品质量浓度升高至一定程度时,水提取物对Fe3+的还原能力最强。（3）利用抗氧化活性筛选结果,对草果极性部位提取物进行分离纯化,结果得到3种单体化合物,经结构鉴定,化合物1是草果素、化合物2是芦丁、化合物3是原儿茶酸。（4）在抗氧化活性实验方面,3种单体化合物均具有较好的抗氧化活性,其中化合物3对清除ABTS自由基和羟基自由基、还原Fe3+能力以及保护羟基导致的DNA损伤作用最强;化合物1对清除超氧阴离子自由基以及螯合Fe2+的能力最强;化合物2对清除DPPH自由基的能力最强。结论:（1）草果不同极性部位提取物对小鼠均具有一定的免疫增强作用,总体来说:正丁醇提取物＞水提取物＞乙酸乙酯提取物＞石油醚提取物;（2）草果不同极性部位提取物对不同自由基均具有一定的清除能力。其中,乙酸乙酯提取物对DPPH、ABTS自由基的清除能力最强;正丁醇提取物对清除超氧阴离子自由基、羟基自由基,Fe2+的螯合能力以及Fe3+还原能力最强,总体来说,草果不同极性部位提取物的抗氧化活性大小顺序为:正丁醇提取物＞乙酸乙酯提取物＞石油醚提取物＞水提取物;（3）利用抗氧化活性筛选结果对草果不同极性部位提取物进行分离纯化,得到3种单体化合物,经结构鉴定,化合物1是草果素、化合物2是芦丁、化合物3是原儿茶酸。（4）3种单体化合物均具有较好的抗氧化活性,其抗氧化构效关系主要是与化合物的空间结构、羟基位置、羟基数量等有关,抗氧化作用机理主要是通过清除自由基来避免氧化损伤。
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