白细胞介素1受体拮抗剂（IL-1Ra）是一种天然的抗炎蛋白,广泛应用于医疗领域,对于一些罕见病,例如冷吡啉相关周期性综合征和成人斯蒂尔病,有着显著的治疗效果。同时,还可用于治疗类风湿性关节炎。目前,IL-1Ra已经被美国FDA和欧盟EMA批准在其国家上市。但是目前国内市场上尚无同类产品。本研究拟利用基因工程技术构建含有卡那霉素抗性基因的重组人白细胞介素1受体拮抗剂（rhIL-1Ra）工程菌株,并建立小试发酵和纯化工艺,以期为rhIL-1Ra的工业化生产提供菌种和技术支持。取得的主要研究结果如下:（1）采用PCR技术获取了IL-1Ra基因片段,将其克隆至pMD-18T载体。酶切鉴定正确后,将IL-1Ra基因片段与pET-28a载体连接,获得重组质粒K-IL-1Ra。将重组质粒K-IL-1Ra转化BL21（DE3）感受态,成功构建了含有卡那霉素抗性基因的rhIL-1Ra工程菌株。（2）使用DOE实验对小试发酵工艺条件进行了探索,确定最适培养温度为37℃,诱导温度为35℃,诱导菌液浓度为OD600=0.60和IPTG浓度为1.0 mM。（3）确定复合型阳离子交换层析纯化工艺为:平衡缓冲液20 mM PB+0.1 M NaCl,pH7.0;淋洗缓冲液20 mM Tris+0.1 M NaCl,pH 9.0;洗脱缓冲液20 mM Tris,pH 9.0;回收缓冲液50 mM Tris,pH 6.0。阴离子交换层析纯化工艺为:平衡缓冲液20 mM His-Bis-Tris,pH8.0;洗脱缓冲液20 mM His-Bis-Tris,pH 5.0以pH梯度洗脱IL-1Ra蛋白。回收缓冲液为1 M Tris,pH 9.0。高分辨阴离子交换介质层析纯化工艺为:平衡缓冲液20 mM His,pH 6.5,洗脱缓冲液20 mM His+0.4 M NaCl,pH 6.5以盐梯度洗脱IL-1Ra蛋白。对高分辨阴离子主峰样品进行分子量鉴定、蛋白纯度鉴定、等电点鉴定相关蛋白鉴定和蛋白纯度鉴定,鉴定结果符合IL-1Ra的特征,且鉴定结果皆符合IL-1Ra蛋白相关标准。初步确立本实验工艺流程适用于新构建的工程菌株中rhIL-1Ra的纯化。