有机磷农药品种多,药效高,用途广,广谱,而且作用方式多种多样,不同的方式效果都能起到很好的效果,是农药当中很重要的一类分支。生化检测方法则因为特异性强,目的性强,灵敏性高快速简单准确的特点正日益成为新兴的有机磷农药残留检测的方法主流,本研究利用筛选出的基因工程单链抗体(ScFv)研究有机磷农药残留检测的免疫分析方法。本研究首先在课题组已经合成的有机磷类通用半抗原H1、H3的基础上,采用活性酯法将通用半抗原与偶联蛋白多聚赖氨酸偶联合成了人工抗原H1-PLL和人工抗原H3-PLL,并且通过紫外分析仪验证了人工抗原的耦合性,确定了偶联成功,偶联比分别为1:15和1:20。然后在本课题组已经构建的抗有机磷类ScFv初级抗体库的基础上,对初级库的抗体进行5轮富集淘筛。在最后两轮的抗体库中挑选60株单克隆,进行间接ELISA检测,筛选得到了两株可表达较高亲和力的ScFv单链抗体菌株。与此同时对菌液进行了原核表达,获得可溶性抗体。初步优化后,得到该两种抗体的终点效价都为1:32000,H1线性回归方程为:B/B0=-62.58LogC+180.75(r2=0.9894),IC50为129.38μg/mL,H3线性回归方程为:B/B0=-67.32LogC+149(r2=0.9808),IC50为51.43μg/mL。