细胞衰老是在其内部或外部因素的诱导下，通过细胞内一系列蛋白因子的信号传导作用来实现的生物学过程。介导细胞走向衰老的信号传导通路主要有两条：p53通路、Rb通路。目前为止，对于两条信号通路的上下游调控因子及其功能尚不清楚，有待于进一步研究。 本研究在前期蛋白质组学所筛选的细胞衰老相关蛋白质中，选取部分在年轻细胞与衰老细胞中表达差异显著的蛋白质，进行进一步的筛选、鉴定。根据鉴定结果，选取有代表性的RNA聚合酶I转录释放因子PTRF(polymeraseIandtranscript-releasefactor)，对其进行细胞定位分析和功能研究。 我们以人胚肺成纤维细胞系W138和IMR90为衰老模型。研究发现，在两种细胞系中，随着细胞的增殖，PTRF的表达量逐渐增多；同时，PTRF的细胞定位也发生变化。在年轻细胞中，PTRF主要定位于细胞核内，而随着细胞的增殖，蛋白的定位逐渐由细胞核内转为细胞膜上，在细胞膜上呈不均匀分布，这一分布与胞膜窖caveolae结构定位相吻合。PTRF蛋白在其36、40、365、366位丝氨酸存在磷酸化位点，我们利用定点突变的方法，研究其磷酸化位点对蛋白定位及其功能的影响。研究发现，PTRF的入核与其N端磷酸化相关，当36、40位丝氨酸单突变或全突变时，PTRF的细胞定位受到影响，导致蛋白在年轻细胞中不能进入细胞核。在年轻W138细胞中过表达PTRF之后，细胞增殖受到抑制，细胞寿命明显缩短。 综上，PTRF通过其表达量和定位的改变使其在细胞中的作用发生变化，这种变化对细胞的衰老起到了促进作用。