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鲍鱼（皱纹盘鲍）作为一种名贵的海珍品,已有研究证明来源于鲍鱼的活性物质具有抗氧化、抗炎症、抗菌、抗血栓和抗癌等效果,但是关于鲍鱼抗癌的研究较少,并且其作用机制还未明确。所以本实验采用人纤维肉瘤HT1080细胞和人脐静脉内皮细胞（HUVEC）作为体外细胞模型,检测了来源于水煮副产物的多肽BAB（EMDEAQDPSEW,1234.40 Da）和鲍鱼肠的多肽AATP（KVEPQDPSEW,1214.30 Da）对于肿瘤细胞转移和血管新生的作用以及作用机制;并通过分子对接分析了BAB和AATP与促血管因子HIF-1α和VEGFR-2之间的相互作用。本论文的研究内容主要分为肿瘤转移和血管生成两部分:一、多肽BAB和AATP的抗肿瘤转移作用:1.利用MTT实验分别测定BAB和AATP对HT1080细胞和HUVEC的细胞活力的影响,并选择对细胞没有毒性的浓度进行后续的实验。实验结果表明,BAB和AATP对HT1080细胞和HUVEC在浓度为10-100μM时,没有细胞毒性。2.利用单细胞克隆实验分别检测BAB（20、50和100μM）和AATP（20、50和100μM）对HT1080细胞增殖能力的影响。实验结果显示,两种多肽对细胞的增殖有显著的抑制效果。3.通过迁移实验和侵袭实验检测BAB（50和100μM）和AATP（50和100μM）对肿瘤细胞转移的抑制作用。实验结果表明,BAB和AATP有效地抑制了细胞的转移和侵袭能力。4.根据转移实验的结果,继续研究与转移相关的基质金属蛋白酶的表达以及活性。主要采用实时定量PCR实验,检测BAB和AATP对与降解ECM相关的MMPs（MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-9和MMP-13）的mRNA水平表达的影响;明胶酶谱和western blotting分析BAB和AATP对MMP-2和MMP-9表达和活性的抑制作用。实验结果表明,BAB的处理抑制了MMP-1、MMP-3、MMP-9和MMP-13的RNA水平,但是对MMP-2影响不明显;明胶酶谱和western blotting分析中,BAB对MMP-9的活性和表达具有显著的抑制作用,但是对MMP-2的活性和表达抑制效果不明显;AATP有效地抑制了MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-9和MMP-13的RNA水平以及MMP-2和MMP-9的活性和蛋白表达。5.进一步通过western blotting、免疫荧光和凝胶迁移实验（EMSA）实验,检测调节转移的信号通路MAPKs和NF-κB的活性。实验结果显示,PMA的刺激激活了MAPKs（p38和ERK）的磷酸化和NF-κB的活性,在BAB和AATP处理后,p38和ERK的磷酸化和NF-κB的活性下调,p65的核易位的量减少以及p65和DNA的结合能力显著性下降。二、多肽BAB和AATP抗血管生成的作用:1.用CoCl2刺激HT1080细胞模拟低氧环境,检测低氧环境下,BAB（20、50和100μM）和AATP（20、50和100μM）肿瘤细胞分泌促血管生长因子VEGF的抑制作用。实验结果显示,BAB和AATP都具有抑制肿瘤细胞分泌VEGF的作用,而且抑制作用具有浓度依赖性。2.检测低氧环境下,BAB和AATP对低氧诱导因子HIF-1α的积累与血管生成相关的信号途径AKT/mTOR/p-70S6K活性抑制情况。实验结果表明,低氧刺激了HIF-1α的表达和AKT/mTOR/p-70S6K的磷酸化,但是经过BAB和AATP处理,HIF-1α的表达和AKT/mTOR/p-70S6K信号都被有效的抑制。3.通过成管实验检测BAB（50和100μM）和AATP（50和100μM）对HUVEC形成血管的抑制作用。实验结果表明,BAB（50和100μM）和AATP（50和100μM）都有减弱了HUVEC成管的能力。4.利用分子对接分析BAB与HIF-1α和VEGFR-2的相互作用;AATP与HIF-1α和VEGFR-2的相互作用。分析结果显示,BAB和AATP分别与HIF-1α和VEGFR-2的活性位点结合,抑制了HIF-1α和VEGFR-2的活性。