土壤放线菌次生代谢产物生防活性的初步研究

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从北京、广州、云南、湖南、四川、新疆采得105份土样,在高氏一号选择性培养基上分离得到912个放线菌菌落。其中,对烟草青枯病菌(Ralstonia solanacearum)有拮抗作用的放线菌5株,对稻瘟病菌(Pyricularia oryzae),烟草黑胫病菌(Phytophthora parasitica var.nicotianae)有拮抗作用的放线菌3株。用那些经初步筛选后菌落的发酵液滤液对烟草青枯病菌、水稻稻瘟病菌、烟草炭疽病菌等做拮抗实验研究。发现D35和D12两个菌株对烟草青枯病有明显的抑制作用,在每个平板加入20微升滤液,抑菌圈直径分别为12毫米和8毫米。D39菌株对水稻稻瘟病菌和烟草炭疽病菌(Colletotrichum nicotianae)有明显的抑制作用,在每个培养皿加入3毫升滤液,菌丝抑制率分别达47.6%和54.2%。拮抗性试验结果表明,放线菌拮抗菌虽然广泛分布于土壤中,但具有强烈抑菌作用的拮抗性菌株是非常稀少的。本试验中所选用的D35、D12和D39分别分离自广州土样、湖南土样和新疆天山土样,经鉴定均属链霉菌属(Streptomyces spp.)。 初步测定拮抗菌D35、D12和D39的最佳培养条件和培养方案。根据试验结果,确定了最佳发酵条件: D12产生抗菌物质的最佳培养液方案是B培养液,最佳培养时间是60小时,最佳培养温度为27±1℃,产生抗菌物质的发酵液的最适pH值为7.0,最佳培养方式为全天振荡培养。 D35产生抗菌物质的最佳培养液方案是B培养液,最佳培养时间是48小时,最佳培养温度为27±1℃,产生抗菌物质的发酵液的最适pH值为7.0,最佳培养方式为全天振荡培养。 D39产生抗菌物质的最佳培养液方案是C培养液,最佳培养时间是72小时,最佳培养温度为27±1℃,产生抗菌物质的发酵液的最适pH值为7.0,最佳培养方式为全天振荡培养。 通过盆栽温室试验表明供试拮抗菌D12不同浓度的发酵液均可以不同程度地降低烟草黑胫病的发病率和病情指数。室内促生长试验表明,发酵液稀释液具有促进油菜种子萌发的作用。
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