大孔树脂对茶多酚提取纯化及茶多酚抗氧化性能研究

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茶多酚是一类富含于茶叶中的多羟基酚类化合物。它具有抗氧化,降血糖,血压等性能,本文围绕茶多酚高效提取与抗氧化工作进行了相关的工作。1、由浸提过程中对料液比、提取次数、浸提温度、浸提时间的考察,结合正交优化,得出最佳浸提条件,即85℃下,料液比(质量:体积)为1:25 g/mL,对茶多酚浸提3次,每次浸提30 min。此条件下浸提率为17.31%。2、考察十二种树脂对茶多酚的选择性能,得出DM-16X型树脂为最佳树脂。在单因素实验基础上,结合正交实验优化工艺参数,得静态吸附最佳工艺为温度25℃,pH值为7,吸附时间3h。该条件下DM-16X型树脂的吸附量为50.58 mg/g。考察上样速度对DM-16X型树脂动态吸附茶多酚的影响,得最佳上样速度为6 BV/h(1BV=10 mL树脂)。由吸附特性曲线图,10 mLDM-16X型树脂对1.51mg/mL的茶多酚溶液的吸附体积宜控制在12.5 BV,此时树脂利用率最大。3、对比乙醇溶液与自制三元脱附液的静态脱附效果,得最佳脱附剂为10%蒸馏水+90%(70%乙醇+30%洗脱剂A),考察时间、温度、pH对脱附的影响,结合响应面优化参数,将工艺改为洗脱剂为30%蒸馏水+70%(70%乙醇+30%洗脱剂A)、温度55℃、pH值为6、时间为2 h。此条件下测得洗脱率为93.37%。对比乙醇溶液与自制三元脱附液的动态脱附效果,得最佳脱附剂体积分数为10%蒸馏水+90%(60%乙醇+40%洗脱剂A),考察速度、体积对动态洗脱的影响,发现当洗脱速度为6 BV/h、体积为80.00 mL时动态洗脱率可达到91.63%。4、通过建立吸附热力学模型,判断DM-16X型树脂对茶多酚的吸附方式属于Langmuir吸附。经计算得ΔG=-2 kJ/mol<0,判断该吸附属于自发过程。由吸附动力学模型的建立,得吸附速率常数k=0.82 h-1,符合一级动力学模型,说明DM-16X型树脂对茶多酚的整个吸附过程主要由扩散步骤控制。5、采用酒石酸亚铁法测出所得产品的茶多酚含量为76.57 wt%,根据UPLC(超高液相色谱)结果得:EGC含量为35.94 wt%;EC含量为4.22 wt%,EGCG含量为18.56 wt%,ECG含量为6.90 wt%;最终计算得4种儿茶素的含量达到65.62 wt%,咖啡碱含量为 16.96 wt%。由茶多酚抗氧化性研究发现,随着浓度的升高,茶多酚产品对DPPH(1,1-二苯基-2-三硝基苯肼)自由基、ABTS(2,2’-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)自由基的清除率逐渐升高。其FRAP(铁离子还原)值也由298.73 μmol/L最终升高至1842.36μmol/L,两种成分的混合液FRAP值也在增大,对比0.02-0.04 mg/mL浓度的茶多酚与抗坏血酸的协同抗氧化能力由273.01 μmol/L上升至708.03 μmol/L,茶多酚产品由限制因子转化为促进作用。三者混合液的FRAP值,也因各成分浓度的增大而升高。且对比0.1-0.3 mg/mL情况下,三种成分自身的FRAP值与三者混合液的差值由2916.79μmol/L增大至3278.39 μmol/L,表明各成分浓度越高,三者产生的协同抗氧化作用越明显。
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