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研究背景:脊髓背角中的细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)在疼痛早期活化,参与疼痛的产生和维持,活化后的细胞外信号调节激酶1和2(ERK1/2)通过对下游转录因子cAMP反应元件结合蛋白(CREB)活性的调控,调节目的基因的表达。脊髓背角神经肽Y(neuropeptide Y,NPY)及其两个受体(Y1R和Y2R)位于脊髓的浅背角,这是伤害性门控和调节的关键区域。此外,NPY及其受体和CREB还可以相互调节。目的:观察电针(Electroacupuncture,EA)对急性炎症疼痛模型大鼠脊髓背角中p-ERK1/2、p-CREB、NPY及其受体(Y1R和Y2R)表达的影响,探讨电针“足三里(ST36)+阳陵泉穴(YC)”治疗急性炎症疼痛的作用机制。方法:将48只雄性大鼠随机分为空白组(Saline组)、模型组(CFA组)、假电针组(CFA+sham EA组)、电针组(CFA+EA组),每组12只,实验大鼠后足底注射完全弗氏佐剂(complete Freund’s adjuvant,CFA)建立急性炎性疼痛模型,在造模成功后第1天,开始电针“ST36+YC”频率2 Hz、幅度1mA、时间20min、连续波,每天1次,连续治疗7天。于建立炎性疼痛模型前(T0)和建模后第1-7天(T1-T7)时,通过热辐射试验、von Frey测试检测实验大鼠热痛阈值(TWL)和机械痛阈值(PWTs)的改变。分别于建模后第3天和第7天(T3和T7),利用免疫组织化学方法检查脊髓背角中NPY、NPY1R及NPY2R表达变化。利用蛋白印迹(Western blot)法检测脊髓背角ERK1/2、p-ERK1/2、CREB、p-CREB、NPY、NPY1R及NPY2R蛋白在脊髓背角中表达。结果:(1)T1时,实验大鼠足底部注射CFA后其TWL和PWTs明显降低,差异有统计学意义(P<0.001)。与Saline组相比,CFA组、CFA+sham EA组实验大鼠的TWL和PWTs逐渐降低,到T3时,其TWL和PWTs降到最低,差异有统计学意义(P<0.001),以后逐渐回升;CFA+EA组与其无明显差异。与CFA组相比,CFA+EA组的PWTs前4天存在显著升高,差异有统计学意义(P<0.001),T4后明显升高,差异有统计学意义(P<0.01),但CFA+EA组的TWL持续正常,差异有统计学意义(P<0.001);CFA+sham EA组与其无明显差异。(2)关于p-ERK1/2、p-CREB:Western blot法结果显示,T3与T7时各组实验大鼠脊髓背角中ERK1/2和CREB蛋白表达无明显差异。与Saline组相比,T3时CFA组和CFA+sham EA组实验大鼠脊髓背角中p-ERK1/ERK1、p-ERK2/ERK2、p-CREB/CREB升高,差异有统计学意义(P<0.05),T7时p-ERK1/ERK1、p-ERK2/ERK2、p-CREB/CREB明显升高,差异有统计学意义(P<0.01),CFA+EA组与Saline组在T3与T7时均无明显差异。与CFA组相比,T3时CFA+EA组实验大鼠脊髓背角中p-ERK1/ERK1、p-ERK2/ERK2和p-CREB/CREB减少,差异有统计学意义(P<0.05),T7时p-ERK 1/ERK1、p-ERK2/ERK2和p-CREB/CREB明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。(3)关于NPY:免疫组化结果显示,与Saline组比较,T3时CFA组和CFA+sham EA组的脊髓背角中NPY明显升高,差异有统计学意义(P<0.01),到T7时升高,差异有统计学意义(P<0.05),T3和T7时CFA+EA组显著升高,其差异有统计学意义(P<0.001)。与CFA组相比,T3时CFA+EA组的脊髓背角中NPY明显升高,差异有统计学意义(P<0.01),持续至T7时显著升高,差异有统计学意义(P<0.001)。Western blot法结果显示,与Saline组比较,T3和T7时CFA组、CFA+sham EA组和CFA+EA组的脊髓背角中NPY显著升高,差异有统计学意义(P<0.001)。与CFA组相比,T3和T7时CFA+EA组的脊髓背角中NPY显著升高,差异有统计学意义(P<0.001)。(4)关于Y1R和Y2R:免疫组化结果显示,与Saline组比较,T3时CFA组和CFA+sham EA组的脊髓背角中Y1R和Y2R明显升高,差异有统计学意义(P<0.01),到T7时显著升高,差异有统计学意义(P<0.001),T3时CFA+EA组与其无明显差异,T7时CFA+EA组升高,其差异有统计学意义(P<0.05)。与CFA组相比,T3时CFA+EA组的脊髓背角中Y1R和Y2R有所降低,差异有统计学意义(P<0.05),持续至T7时差异仍有统计学意义(P<0.05)。Western blot法结果显示,与Saline组比较,T3和T7时CFA组、CFA+sham EA组的脊髓背角中Y1R显著升高,差异有统计学意义(P<0.001);T3和T7时CFA+EA组脊髓背角中Y1R与其比较差异有统计学意义(P<0.001,P<0.01)。与CFA组相比,T3时CFA+EA组的脊髓背角中Y1R显著降低,差异有统计学意义(P<0.001),持续至T7时CFA+EA组的脊髓背角中Y1R人仍明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。与Saline组比较,T3时CFA组、CFA+sham EA组的脊髓背角中Y2R明显升高,差异有统计学意义(P<0.01),T7时CFA组、CFA+sham EA组的脊髓背角中Y2R显著升高,差异有统计学意义(P<0.001);T3和T7时CFA+EA组脊髓背角中Y2R与其比较差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。与CFA组相比,T3时CFA+EA组的脊髓背角中Y2R降低,差异有统计学意义(P<0.05),持续至T7时CFA+EA组的脊髓背角中Y2R仍明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:(1)电针治疗可以有效缓解CFA炎性疼痛模型大鼠的热痛觉过敏和机械超敏。(2)ERK1/2-CREB信号通路可能参与急性炎性疼痛的形成,电针缓解急性炎性疼痛的机制可能与下调脊髓背角中ERK1/2-CREB信号通路有关。(3)电针可能通过诱导急性炎性疼痛模型大鼠脊髓背角中NPY大量表达、抑制Y1R和Y2R受体表达发挥抗伤害作用。(4)电针可能通过ERK1/2-CREB信号通路调节NPY及其受体的表达。