【摘 要】
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研究背景及目的:糖尿病足溃疡是糖尿病的一种致残性并发症,治疗困难且复发率高。患者的生活质量低,心理社会适应能力差。该病在全球范围内占用了大量的糖尿病医疗资源。创面愈合是一种调控精密、程序复杂的生理过程。导致糖尿病足溃疡愈合延迟最显著的原因可能是创面局部持续的炎症反应阻碍了肉芽组织的形成,而持续的炎症反应可能是由血管损伤引起的。其他因素还包括:生长因子分泌减少、细胞因子紊乱、角质形成细胞增殖和迁移功
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（81773348）；
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研究背景及目的:糖尿病足溃疡是糖尿病的一种致残性并发症,治疗困难且复发率高。患者的生活质量低,心理社会适应能力差。该病在全球范围内占用了大量的糖尿病医疗资源。创面愈合是一种调控精密、程序复杂的生理过程。导致糖尿病足溃疡愈合延迟最显著的原因可能是创面局部持续的炎症反应阻碍了肉芽组织的形成,而持续的炎症反应可能是由血管损伤引起的。其他因素还包括:生长因子分泌减少、细胞因子紊乱、角质形成细胞增殖和迁移功能改变、成纤维细胞及肌成纤维细胞增殖减弱且合成分泌细胞外基质能力下降、金属蛋白酶合成增多、炎症细胞功能异常等。糖尿病足溃疡的治疗包括内科治疗、外科治疗及局部溃疡处理。局部处理有创面换药、清创引流、敷料覆盖、局部用药、负压引流术等,但效果不太理想。光生物调节作用和光动力疗法是促进创面愈合的两种光疗方式。光生物调节作用是一种非侵入性的治疗方法,通过激光或LED设备直接照射靶组织,达到促进溃疡愈合和减轻疼痛的作用。光动力疗法也是一种非侵入性的方法,全身或局部光敏剂给药后,运用与光敏剂吸收相匹配波长的光照射负载光敏剂的靶组织,达到治疗效果。光调作用和光动力疗法都有促进创面愈合的作用,它们治疗参数不同,作用机制可能也不尽相同。因此,为探索两种治疗方式在不同应用剂量的情况下对糖尿病溃疡愈合的作用,我们设计了本实验。实验方法:（1）构建糖尿病大鼠模型,并在此基础上构建非感染性创面模型和金黄色葡萄球菌感染性创面模型;（2）比较正常血糖大鼠创面/糖尿病大鼠非感染创面愈合率、以及糖尿病大鼠非感染创面/糖尿病大鼠感染创面愈合率,验证创面模型是否达预期效果;（3）研究不同剂量LED红光（12/24/48/96 J/cm~2）对Ⅰ型糖尿病大鼠背部非感染性创面愈合率的影响;（4）研究不同浓度ALA-PDT（2.5%/5.0%/10%/20%）对Ⅰ型糖尿病大鼠背部非感染性创面愈合率的影响;（5）比较LED红光和ALA-PDT对T1DM大鼠非感染性创面愈合率的影响;（6）研究不同剂量LED红光（12/24/48/96 J/cm~2）对Ⅰ型糖尿病大鼠背部感染性创面愈合率的影响;（7）研究不同浓度ALA-PDT（2.5%/5%/10%/20%）对Ⅰ型糖尿病大鼠背部感染性创面愈合率的影响;（8）比较LED红光和ALA-PDT对T1DM大鼠背部感染性创面愈合率的影响;（9）在Ⅰ型糖尿病大鼠背部感染性创面中,研究ALA-PDT、LED红光及空白对照组处理后,对创面部位细菌载量、胶原沉积及巨噬细胞浸润的影响。实验结果:（1）糖尿病大鼠相比于正常血糖大鼠创面愈合延迟,糖尿病大鼠感染性创面相比非感染性创面愈合延迟;（2）在本实验所设置的能量密度下,LED红光能促进T1DM大鼠非感染性创面的愈合。能量密度为24J/cm~2和48J/cm~2时效果更好,增加或减小剂量作用降低;（3）在本实验所设置的ALA浓度下,ALA-PDT能促进T1DM大鼠非感染性创面的愈合。ALA浓度为2.5%和5%效果较好,增加ALA浓度其促进作用降低;（4）LED红光和ALA-PDT相比,在促进T1DM大鼠非感染性创面愈合中的作用无明显差异;（5）在本实验所设置的能量密度下,LED红光对T1DM大鼠感染性创面无明显促进愈合的作用;（6）在本实验所设置的ALA浓度下,ALA-PDT能促进T1DM大鼠感染性创面的愈合。ALA浓度为5%和10%效果较好,增加或减少ALA浓度其促进作用降低;（7）在Ⅰ型糖尿病大鼠背部感染性创面中,10%ALA-PDT处理后创面部位金黄色葡萄球菌培养计数在第3、7、10天明显降低,胶原沉积在第10、14天明显增多,巨噬细胞浸润在第10、14天明显减少,上述三项指标有统计学差异。结论:（1）T1DM大鼠与正常大鼠相比,创面愈合延迟;T1DM大鼠感染创面比非感染创面愈合缓慢;本实验造模成功,模型稳定。（2）LED红光和ALA-PDT均能促进T1DM大鼠背部非感染性创面愈合,在观察终点,二者作用效果无明显差异。（3）PDT能促进T1DM大鼠背部感染性创面愈合,而LED则不能促进T1DM大鼠背部感染性创面愈合。（4）ALA-PDT促进T1DM大鼠背部感染性创面愈合的部分机制是:降低创面细菌载量、促进胶原生成、调节巨噬细胞浸润。
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