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杉木(Cunninghamia lanceolata Hook.)作为重要的商品用材和造林树种,需求量日益增加,建立和优化高效的杉木体细胞胚胎发生体系对于育种育苗和生产都具有重要意义。本文以混合采种的杉木成熟合子胚、未成熟合子胚以及3个特定母本基因型的杉木未成熟合子胚作为外植体,研究了合子胚成熟时期、基本培养基种类、母本基因型、外源添加剂塞苯隆(TDZ)和茉莉酸甲酯(MeJA)对杉木胚性愈伤组织诱导的影响,提高了胚性愈伤组织的诱导率;以实验室原有保存的3个胚性愈伤组织细胞系(2#、6#、10#)和新诱导得到的3个胚性愈伤组织细胞系(Z2#、Z17#、Z22#)为材料,研究了脱落酸(ABA)、赤霉素(GA3)与聚乙二醇(PEG)及氧化还原条件对杉木体胚成熟培养的影响,优化了杉木体胚成熟培养体系。本研究为优化现有的杉木体细胞胚胎发生体系中体细胞胚胎诱导困难、体胚成熟率低等难题提供理论依据和技术支撑。本研究的结果如下:(1)以7月初取处于裂生多胚期的杉木未成熟合子胚作为外植体,以DCR培养基为基本培养基,添加蔗糖30 g/L、活性炭1 g/L、倍力凝5 g/L并附加植物生长调节剂 2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)1.5mg/L、激动素(KT)0.4 mg/L,MeJA 1.2μmol/L和TDZ 0.004 mg/L条件下,杉木胚性愈伤组织的诱导率最高,达19.83%。(2)中山039、中山042和中山047为母本的杉木胚性愈伤组织诱导率都达到16%以上,分别为18.13%、16.83%和17.22%,其胚性愈伤组织诱导率在杉木胚性愈伤组织诱导研究中已达到较高的水平,3个基因型的供体母株均可用于今后的试验取材选择。(3)杉木胚性愈伤组织的诱导过程中,原胚团经历PEM I、PEM II和PEM III三个阶段,在诱导过程中会出现胚性愈伤组织和非胚性愈伤组织,两者差异明显,胚性愈伤组织有晶亮的光泽感,表面有一些突起结构,原胚团多数处于PEM III时期;非胚性愈伤组织出现液态化的特点,质地疏松粘连性差,无规则的形状,细胞团的细胞多为圆形或椭圆形,松散没有极性结构。(4)以新诱导得到的胚性愈伤组织细胞系为材料,以DCR为基本培养基,附加蔗糖30g/L、倍力凝5g/L、活性炭1 g/L、AgN03 10 mg/L,并添加植物生长调节剂ABA50μmol/L+GA3 0.8 mg/L+PEG8000 180 g/L,体胚成熟率最高,达到 87.50%,早期体细胞胚的数量达185.33个/g。(5)氧化还原条件的改变对杉木体胚成熟培养有显著影响,在杉木体细胞胚成熟培养的早期,外源添加0.25 mmol/L还原型谷胱甘肽(GSH)具有较好的促进体胚成熟培养作用。