干燥综合征阴虚证患者中miR-17-92的表达与临床谱及中医证型的相关性研究

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目的:干燥综合征是一种以淋巴细胞增殖浸润及进行性的外分泌腺体损伤为特征的常见自身免疫疾病。Th1/Th2细胞因子失衡、B细胞高度活化是SS的发病机制之一。microRNA(miRNA)是一类高度保守的小序列非编码RNA,其被证实在机体固有免疫及适应性免疫中发挥重要作用,并参与自身免疫病的发病机制。多个miRNA被发现在SS患者的唾液腺、PMBC、唾液中特异性表达。miR-17-92基因簇被证实在B细胞的活化中起重要调节作用,然miR-17-92与SS患者中的表达在国内外研究报导甚少。基于该现状,本研究通过分析SS阴虚证患者与健康对照(Health Control, HC)者的PBMC中miR-17-92基因簇表达,及与SS阴虚证患者的临床谱的相互关系,以期鉴定与疾病的发生和发展相关的miRNA,并进一步探索SS阴虚证型与miRNA的内在联系,为SS辩证的客观化和临床治疗提供依据。方法:应用实时荧光定量PCR (Quantitive Real-time PCR, qPCR)方法检测miR-17-92基因簇(编码miR-17, miR-18a/b, miR-19a, miR-20a, miR-19b-1,miR-92-1)在SS阴虚证型中的相对表达量,以U6RNA为内参物,采用2-△△CT对其表达量进行相对定量。收集患者血沉、免疫球蛋白、唇腺病理、ESSDAI评分、中医证候评分等临床资料,分析miR-17-92表达与SS患者临床谱及中医证候评分的相关性。所有数据用SPSS17.0统计分析。计量资料采用表示。两样本计量资料采用独立样木t检验,多组样本均数比较采用One-way ANOVA检验,相关分析采用Spearman或Person相关分析方法,P≤0.05为有统计学意义结果:1.本研究通过实时荧光定量PCR检测20例SS患者PBMC中miR-17-92基因簇的表达,发现其中miR-17, miR-19a, miR-20a在RA患者的表达水平高于健康人群,与正常对照组相比miR-17, miR-19a, miR-20a相对表达量分别是2.990、1.559和1.490。2.进一步研究发现,miR-17、miR-19a在高IgG组有差异性表达(P<0.05)。miR-19a与ANA滴度存在正相关性(r=0.398);且在唇腺重度浸润组具有差异性表达(P<0.05)。ESSDAI评分分组中,病情轻度活动组和中度以上活动组两组间miR-17-92表达无统计学差异。3.SS阴虚型患者miR-17a、miR-19a与中医证候积分具有正相关性,(r=0.441,r=351)。结论:1.SS患者外周血中miR-17, miR-19a, miR-20a的表达水平上调,可能与SS的发病机制相关。2. miR-17与IgG表达量有一定相关性,miR-19a与IgG表达量、ANA滴度、唇腺浸润程度存在正相关性,推断与其调控B细胞活化功能相关,可能是作为监测SS疾病活动的有效指标。3.miR-17、miR-19a与SS阴虚证型相关,可为中医辨证的逐步客观化具体化提供一定的参考依据。
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