【摘 要】
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鸭沙门氏菌病又称为鸭副伤寒,是一种传播速度快、发病率高的细菌性传染病。主要发生在1-3周龄的雏鸭群,通常呈地方流行性,呈现出较高的发病率和病死率。近年来,随着鸭养殖模式的改变,规模化、集约化养殖逐渐增多,鸭沙门氏菌病严重阻碍养鸭业发展。为防治鸭沙门氏菌病,人们在养殖过程使用了大量的抗生素,导致沙门氏菌对抗生素的耐药性越来越严重。因此,明确来自鸭养殖环节的沙门氏菌分离株的耐药性及耐药基因的分布规律,
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鸭沙门氏菌病又称为鸭副伤寒,是一种传播速度快、发病率高的细菌性传染病。主要发生在1-3周龄的雏鸭群,通常呈地方流行性,呈现出较高的发病率和病死率。近年来,随着鸭养殖模式的改变,规模化、集约化养殖逐渐增多,鸭沙门氏菌病严重阻碍养鸭业发展。为防治鸭沙门氏菌病,人们在养殖过程使用了大量的抗生素,导致沙门氏菌对抗生素的耐药性越来越严重。因此,明确来自鸭养殖环节的沙门氏菌分离株的耐药性及耐药基因的分布规律,为鸭场沙门氏菌的耐药性研究及规范临床选用抗生素提供科学依据。本研究通过对集约化鸭场分离的43株来自泄殖腔棉拭子、饲料、饮用水、粪便、空气、土壤样品共计23种血清型沙门氏菌进行耐药性检测。利用纸片法检测对12种常用抗菌药物的敏感性;利用PCR法检测抗菌药物对应的11种耐药基因,以获得鸭源沙门氏菌的耐药谱和耐药基因的携带情况,比较分析不同来源、血清型菌株的耐药特征、耐药基因分布规律及突变特征。1.鸭源沙门氏菌的耐药表型及多重耐药性分析采用纸片法对43株鸭源沙门氏菌进行12种常用抗生素（阿莫西林、头孢噻肟、阿米卡星、庆大霉素、多西环素、新霉素、大观霉素、林可霉素、红霉素、氟苯尼考、环丙沙星、恩诺沙星）的耐药率检测。结果显示,43株鸭源沙门氏菌对12种抗生素都表现出了不同程度的耐药:对林可霉素和红霉素的耐药率高达97.67%,其次是新霉素（62.79%）、多西环素（58.14%）、氟苯尼考（53.49%）、大观霉素（48.84%）、阿莫西林（46.51%）、庆大霉素（44.19%）、头孢噻肟（37.21%）、恩诺沙星（32.56%）、环丙沙星（25.58%）、阿米卡星（13.95%）。对7大类12种抗菌药物都耐药的菌株分布在病牛沙门氏菌、科特布斯沙门氏菌、阿姆德尔尼斯沙门氏菌和伦敦沙门氏菌4种血清型中;分离来自泄殖腔、粪便、饲料、土壤样本中的沙门氏菌菌株存在10重以上耐药谱,空气中分离得到的3株沙门氏菌耐药数量均为2耐。本试验中43株鸭源沙门氏菌耐药表型与耐药基因型存在不同程度的符合率,其中大环内酯类与氨基糖苷类符合率最高（100%）。2.鸭源沙门氏菌的耐药基因分布规律对不同来源的43株鸭源沙门氏菌利用PCR技术进行耐药基因检测,结果显示,耐药基因检出率最高的为flo R（48.84%）,其次是tet A（44.19%）、CTX和TEM（41.86%）、rmt B（6.98%）、ere A（4.65%）,SHV检出率最低为2.33%,CMY、arm A基因则未检测出。另外检出喹诺酮耐药决定区基因gyr A、par C,经测序后进行氨基酸序列比对得出:gyr A基因中共筛选出3种氨基酸突变类型,分别为Ser16 Phe+Asp20Asn、Ser16 Phe和Asp20Gly;par C基因共筛选出4种氨基酸突变类型,分别为2种不同类型的35个氨基酸位点突变、1种34个氨基酸位点突变、1种11个氨基酸位点突变。6类样本中泄殖腔肛拭子中耐药基因种类最多,共检测出8种耐药基因CTX（44.44%）、ere A（11.11%）、flo R（55.56%）rmt B（16.67%）、SHV（5.56%）、tet（A）（44.44%）和TEM（44.44%）;土壤中无耐药基因检出。提示鸭体是耐药基因重要的贮存库和耐药性散播的重要来源。43株沙门氏菌共分布于23种血清型。其中,科特布斯沙门氏菌是携带耐药基因种数最多的血清型,共携带7种耐药基因;其次是肠炎沙门氏菌血清型和阿姆德尔尼斯沙门氏菌血清型各含有6种耐药基因;博纳雷恩沙门氏菌血清型、伦敦沙门氏菌血清型、名古屋沙门氏菌血清型、慕尼黑沙门氏菌血清型各含有1种耐药基因。
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