【摘 要】
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目的本实验拟制备重组ENO1单克隆抗体可变区基因的腺相关病毒（rAAV-ENO1mAb-5）,介导重组ENO1单抗可变区基因靶向进入细胞质,体外研究rAAV-ENO1mAb-5对宫颈癌Hela细胞糖酵解的影响,及其对宫颈癌Hela细胞的生长抑制作用。方法1.在实验室前期基础上,选择ENO1单抗H5的可变区序列,中间用Linker--（GGGGS）3连接,Xba I和Hind III为酶切位点,将其
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目的本实验拟制备重组ENO1单克隆抗体可变区基因的腺相关病毒（rAAV-ENO1mAb-5）,介导重组ENO1单抗可变区基因靶向进入细胞质,体外研究rAAV-ENO1mAb-5对宫颈癌Hela细胞糖酵解的影响,及其对宫颈癌Hela细胞的生长抑制作用。方法1.在实验室前期基础上,选择ENO1单抗H5的可变区序列,中间用Linker--（GGGGS）3连接,Xba I和Hind III为酶切位点,将其克隆在pAAV2-MCS载体上,得到重组质粒AAV-ENO1 mAb-5,将重组质粒AAV-ENO1 mAb-5和辅助质粒（p Helper、pAAV-RC）共转染到AAV293细胞中,得到rAAV-ENO1mAb-5。同时将带有绿色荧光蛋白的pAAV-IRES-Zs Green5转入AAV293细胞中,作为空载体对照（rAAV-GFP）。2.采用Na Cl-PEG8000和冰乙醇沉淀法进行粗纯化和浓缩,并用TCID50法测定二者的滴度。3.通过糖酵解试剂盒测定rAAV-ENO1mAb-5对Hela细胞糖酵解产物（丙酮酸和乳酸）的抑制作用。4.通过MTT实验、划痕实验体外检测rAAV-ENO1mAb-5对宫颈癌Hela细胞的生长抑制作用。结果1.成功制备rAAV-ENO1mAb-5和rAAV-GFP,转染效率为90%,二者滴度均为2.0×107PFU/ml。2.rAAV-ENO1mAb-5对Hela细胞糖酵解产物（丙酮酸和乳酸）的生成有明显抑制作用（P<0.01）。3.当rAAV-ENO1mAb-5的MOI值达到80时,Hela细胞增殖率为（48.38±3.94）%,与rAAV-GFP组和PBS组相比有显著统计学差异（P<0.001）。4.划痕实验中,rAAV-ENO1mAb-5对Hela细胞有显著的迁移抑制作用,与rAAV-GFP组和PBS组相比具有明显统计学差异（P<0.01）。结论1.rAAV-ENO1mAb-5高效、靶向负载ENO1单克隆抗体可变区基因进入细胞质;2.rAAV-ENO1mAb-5能够明显抑制宫颈癌Hela细胞乳酸和丙酮酸生成;3.rAAV-ENO1mAb-5可抑制宫颈癌细胞增殖、迁移。
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试验旨在探究中华绒螯蟹肝胰脏和肠道中消化酶最适温度和pH值，研究饵料中小麦淀粉水平对中华绒螯蟹消化酶比活力的影响。选择平均体重为（10.0±0.1） g的中华绒螯蟹300只，随机分为5组，每组3个重复。各组中华绒螯蟹分别投喂小麦淀粉水平为12.0%、17.0%、22.0%、27.0%、32.0%的配合饵料。试验期60 d。结果显示，中华绒螯蟹肝胰脏和肠道中蛋白酶最适温度均为55℃，肝胰脏和肠道中蛋
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目的:探讨母婴床旁护理模式对初产妇及家属母婴护理技能、健康知识掌握程度和护理满意度的影响。方法:选取2020年1—12月在福建医科大学附属三明第一医院产科产检及分娩的400例初产妇作为研究对象,随机分为对照组和观察组,每组各200例。对照组实施常规护理,观察组则实施母婴床旁护理,对比两组初产妇及家属对母婴护理技能、健康知识掌握程度及护理满意度的情况。结果:实施母婴床旁护理模式后,观察组初产妇及家属
研究目的通过观察急性心肌梗死（AMI）患者治疗前后心室重构指标的变化、主要不良心血管事件（MACEs）以及不良反应出现情况的差异,比较分析沙库巴曲缬沙坦相比血管紧张素转化酶抑制剂（ACEI）对AMI后心室重构防治的临床有效性和安全性。为AMI后心室重构的防治寻找更加有效的药物,从而更好的改善AMI患者的预后。研究方法选取2018年10月至2020年10月入住甘肃省人民医院心内科符合标准的AMI患者
目的:比较达芬奇机器人直肠癌根治术经肛门取标本与经腹壁取标本的短期临床疗效,探讨机器人直肠癌经肛门取标本手术（robotic-assisted trans-anal NOSES for rectal cancer）的安全性和有效性。方法:根据纳入和排除标准,通过回顾性研究方法,收集并分析2018年1月至2020年12月甘肃省人民医院肛肠科135例行机器人直肠癌根治术患者的临床资料,其中NOSES组
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背景:临床上因骨病、创伤、手术等因素造成的骨缺损逐年增加。复杂的骨缺损治疗难度大,致残率高。修复骨缺损并重建其功能一直是骨科领域研究的热点。自体骨移植或者异体骨移植常作为治疗骨缺损的基本方法。自体骨移植优势明显,临床应用广泛,但也受到“供量”不足、供区血肿等并发症的影响。异体骨不受形态、大小限制,使用方便,来源充足,但是异体骨移植会发生相关并发症,比如,免疫反应、感染、骨愈合延迟、骨吸收等。近年来