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目的： 白细胞衍生趋化因子2（leucocyte cellderivedchemotaxin 2,LECT2）是一个多功能的蛋白质，与细胞生长、分化、损伤修复及免疫等过程相关。有关研究发现，在受损肝组织的重建以及肝移植再生、类风湿性关节炎、肾淀粉样病变、代谢性疾病以及肿瘤细胞生长和迁移等多种病理和生理过程都有LECT2参与。人类LECT2 分子量为16kDa ，其氨基酸序列与鸡骨髓瘤蛋白(myb induced myeloid protein-1,Mim-1)具有高度同源性，提示LECT2与Mim-1基因有共同的进化起源。Mim-1特异的表达在鸡的正常和转化的早幼粒细胞中，并且是已知的受Myb特异性调控的靶基因之一。c-Myb是一个在进化过程中高度保守的转录因子，在造血及细胞增殖、变异和凋亡过程中起着重要的调节作用。c-Myb蛋白的高表达，也是许多恶性实体肿瘤组织中及白血病的发病机理之一。目前，对于LECT2是否是受c-Myb特异性的调控的靶基因之一，以及它们之间的相互作用是否会对细胞的生长和迁移、组织的再生、造血、免疫、炎症、肿瘤等一系列重要的生理和病理过程造成影响尚未有相关的研究报道。本实验以斑马鱼为研究对象，构建以斑马鱼lect2l基因启动子为启动序列的双荧光报告基因系统，研究斑马鱼 lect2l是否是受c-Myb特异性调控的靶基因，c-Myb蛋白是否对斑马鱼lect2l基因具有转录激活作用。 方法： 为研究斑马鱼c-Myb与lect2l的靶标关系，本实验首先以斑马鱼AB野生型品系基因组DNA为模板，采用PCR方法克隆斑马鱼lect2l基因启动子序列，酶切后连接至萤火虫荧光素酶报告基因载体pGL4.20启动子区域，构建重组荧光素酶报告基因载体pGL4.20-lect2lp。并采用酶切和测序方法鉴定载体pGL4.20-lect2lp是否构建成功。lect2l基因启动子荧光素酶报告基因载体pGL4.20-lect2lp构建成功后，采用阳离子脂质体法将其与c-myb表达载体及pRL-CMV内参质粒共转染293T细胞。同时以pCS2空白质粒、pGL4.20-lect2lp重组质粒和pRL-CMV内参质粒作为不同的实验组，使用化学发光仪检测荧光强度并计算比值，并分析c-Myb对lect2l启动子的激活作用。 结果： 酶切和测序证实了克隆的斑马鱼lect2l基因启动子序列正确、无突变。构建的重组荧光素酶报告基因质粒pGL4.20-lect2lp与c-Myb表达载体及pRL-CMV内参质粒成功共转染293T细胞，对荧光强度比值进行检测，发现转染c-Myb的表达质粒 pCS2-cMyb、pGL4.20-lect2lp 质粒以及 pRL-CMV 的实验组荧光比值比转染不含c-Myb的表达的空白质粒pCS2、pGL4.20-lect2lp质粒及pRL-CMV的对照组明显要高，表明c-Myb蛋白能激活lect2l基因的表达。 结论： 斑马鱼lect2l基因启动子驱动的荧光素酶表达载体pGL4.20-lect2lp构建成功，为今后探究lect2l基因的表达调控提供了实验基础同时本研究通过将构建载体转染人293T细胞，利用双荧光素酶报告基因系统初步分析了斑马鱼c-Myb蛋白对lect2l基因的的靶标关系，结果提示斑马鱼c-Myb蛋白对lect2l基因有转录激活作用。