L-MS测定黄连柏中木兰花碱含量及其对HERG钾通道电流的影响

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目的:建立同时测定黄连黄柏中木兰花碱含量的液相色谱-质谱联用法,同时考察木兰花碱对HERG钾通道电流的影响。   方法:(1)含量测定:样品经甲醇提取后,采用Agilent Eclipse XDB-C18 ODS色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm)分离,流动相甲醇-水60:40(v/v);流速0.8mL·min-1。质谱采用电喷雾离子化(ESI)方式,正离子采集,以多离子反应监测(MRM)模式对木兰花碱进行含量测定。(2)电生理:采用全细胞膜片钳技术,在稳定表达HERG基因的HEK293细胞中,研究木兰花碱对HERG电流的影响。   结果:(1)木兰花碱在4.352~2720 ng·mL-1线性关系良好。黄连、黄柏平均加样回收率均在98%以上。(2)木兰花碱能够浓度依赖性的促进HERG电流。   结论:(1)该方法简便、灵敏、准确,可用于黄连黄柏中木兰花碱的含量测定,为该药材的质量控制提供依据。(2)木兰花碱对HERG电流起促进作用。
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