论文部分内容阅读
目的:1、探讨MLPA技术在假肥大型肌营养不良症(DMD/BMD)患者基因诊断中的应用价值,完善其基因诊断体系。2、深入分析DMD/BMD患者基因型与临床表型之间的关系,为判断疾病预后及基因治疗提供参考。3、探讨MLPA定量技术在DMD/BMD携带者检测中的优势,为遗传咨询提供可靠的依据。方法:1、应用MLPA技术对355例DMD/BMD患者进行Dystrophin基因检测,对于单一外显子缺失或峰面积比值偏低的外显子采用PCR及测序进行验证。2、用SPSS13.0统计软件包对患者Dystrophin基因阅读框是否移码与临床表型之间的相关性及基因突变大小范围、突变类型与临床表型之间的相关性进行统计分析。3、应用MLPA技术对46名缺失型患者的母亲及8名重复型患者的母亲进行携带者检测,并比较两组患者母亲携带者频率。结果:1、355例患者的Dystrophin基因经MLPA技术检测,发现其中187例为1个或多个外显子缺失,34例为外显子重复突变,5例为微小突变,129例患者未见缺失及重复。2、患者的基因阅读框是否移码与临床表型具有相关性,91.55%的DMD患者及86.27%的BMD患者符合“阅读框规则”;而患者Dystrophin基因突变大小范围、突变类型与临床表型之间的关系无统计学意义。3、46名缺失型患者的母亲经MLPA检测发现28名母亲为缺失型携带者,8名重复型患者的母亲中,6名为重复型携带者,两组患者母亲携带者频率经卡方检验证明无统计学差异(χ2=0.135,P=0.713)。结论:1、MLPA技术可检测出患者Dystrophin基因全长外显子的缺失或重复,提高了基因检测的效率、敏感性和稳定性,单外显子缺失或峰面积比值偏低的外显子,须结合PCR及测序,可以使结果更为精准。2、绝大部分DMD/BMD患者基因型与表型的关系遵循“阅读框规则”,为基因治疗提供了理论依据;Dystrophin基因突变大小范围、突变类型与临床表型无关。3、应用MLPA技术可以对Dystrophin基因的拷贝数进行准确定量,适于携带者判定,为遗传咨询提供了可靠的依据。