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目的研究吡格列酮(PGZ)对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)体外肝细胞模型胎球蛋白A(Fet A)转录和表达的影响及可能的作用机制。方法1.油酸(OA)诱导Hep G2细胞建立NAFLD体外肝细胞模型,油红O染色观察细胞观察其脂肪变性程度;分别用酶联免疫吸附测定法(ELISA)和实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)测定不同浓度OA培养后Hep G2细胞的Fet A的m RNA及蛋白含量。2.0.25m M OA诱导Hep G2细胞,并用25mM PGZ干预。分别用real-time PCR和蛋白质免疫印迹(WB)测各组Fet A的m RNA及蛋白含量。具体分组如下:1空白对照组(Control):用DMSO预处理,OA浓度为0.00 m M,无PGZ干预;2阴性对照组(Control+PGZ):用DMSO预处理,OA浓度为0.00 m M,并用25mM PGZ干预;3阳性对照组(OA):用0.25m M OA预处理,无PGZ干预;4实验组(OA+PGZ):用0.25m M OA预处理,并用25mM PGZ干预。3.重组腺病毒转染PPAR-γ1 si RNA至Hep G2细胞使PPAR-γ沉默,再用25mM PGZ干预正常细胞及PPAR-γ1沉默的Hep G2细胞48小时,用WB检测各组PPAR-γ和Fet A的蛋白表达水平,具体分组如下:1空白对照组(Control):正常Hep G2细胞,未用25mM PGZ干预;2阳性对照组(Control+PGZ):正常Hep G2细胞,并用25mM PGZ干预;3阴性对照组(si RNA):PPAR-γ1沉默后的细胞,未用25mM PGZ干预;4实验组(si RNA+PGZ):PPAR-γ1沉默后的细胞,并用25mM PGZ干预。结果1.随OA浓度增加红染脂滴呈现递增趋势,OA成功诱导Hep G2细胞构建NAFLD体外肝细胞模型;随着OA浓度增加,Fet A的m RNA转录及蛋白表达呈现增加趋势,呈剂量依赖性,从0.15m M OA组开始各组Fet A的m RNA及蛋白水平与0.00m M OA组相比差异有统计学意义(P<0.05)。2.分别比较Control组与Control+PGZ组、OA组与OA+PGZ组,有PGZ干预的Control+PGZ组及OA+PGZ组Fet A的m RNA转录及蛋白表达均较无PGZ干预组的Control组及OA组明显下降(P<0.05)。PGZ对无OA诱导脂肪变性的Hep G2细胞和有OA诱导的NAFLD体外肝细胞模型Fet A的m RNA转录的抑制率分别为89.47%、87.38%,相差2.09%,而对Fet A蛋白表达的抑制率分别为51.97%、67.82%,相差15.85%。3.Control+PGZ组PPAR-γ蛋白表达较Control组增多,Fet A蛋白表达较之减少;si RNA组PPAR-γ蛋白表达较Control组减少,Fet A蛋白表达较之增多;si RNA+PGZ组PPAR-γ蛋白表达较si RNA组增多,Fet A蛋白表达较之减少。结论1.肝细胞脂肪变性程度与OA浓度呈正相关;2.肝细胞转录及表达Fet A水平和肝细胞脂肪变性程度呈正相关;3.PGZ可显著抑制油酸诱导的体外NAFLD肝细胞模型的Fet A转录和表达;4.PPAR-γ1沉默后Fet A蛋白表达的升高可被PGZ逆转;5.PGZ可能通过激活PPAR-γ来抑制肝脏Fet A的合成从而治疗NAFLD。