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T-2毒素是由多种镰孢菌属真菌产生的单端孢霉烯族化合物,其具有很强的免疫毒性、致畸性、致癌性。T-2毒素广泛分布于自然界,主要污染大米、小麦、玉米等粮油产品及相关制品。为了确保人民群众的“舌尖上的安全”,各国制定了粮油产品及制品的国家标准。检测方法是限量标准执行的保障,现有真菌毒素的检测方法主要有免疫分析法和仪器分析法。本文利用高灵敏的单克隆抗体建立了T-2毒素的免疫分析法和仪器分析法。本论文主要研究内容包括如下：1.利用高灵敏T-2单克隆抗体,建立了间接竞争ELISA方法。通过优化抗原包被浓度、抗体稀释倍数、反应体系pH值、盐离子浓度、封闭物、甲醇含量等的实验条件,建立了大米、玉米、饲料三种基质标准曲线。该方法对大米的灵敏度为2.79ng/mL,LOD为0.16ng/mL,检测线性范围是0.43-63.15ng/mL;该方法对玉米的灵敏度为3.21ng/mL, LOD为0.18ng/mL,检测线性范围是0.46-66.82ng/mL;该方法对饲料的灵敏度为5.23ng/mL, LOD为0.21ng/mL,检测线性范围是0.61～71.341ng/mL。该方法加标回收率为94.8%～-112.3%,实际样本的测试结果显示,变异系数在2.8%-13.3%之间,说明该方法重现性良好。2.研制了T-2毒素时间分辨荧光免疫层析试纸条。采用氧化铕聚苯乙烯荧光微球,与T-2单克隆抗体进行偶联,制备荧光探针。通过优化偶联过程中EDC的使用量、抗体的使用量,制备了时间分辨荧光免疫层析试纸条；继而优化了硝酸纤维素膜、样品垫最佳封闭液、缓释液、划线抗原抗体使用量及荧光探针稀释倍数等因素,根据基质不同,建立了大米、玉米、饲料时间分辨荧光免疫层析技术检测标准曲线。该方法对大米、玉米基质的检测线性范围为0.125-200ng/mL,相关系数>0.99,LOD为0.09ng/mL;对饲料基质的检测线性范围为0.25-200ng/mL,相关系数>0.98,LOD为0.17ng/mL。该方法加标回收率在94.2%-111.0%之间。实际样本的测试结果显示,变异系数在2.3%-14.8%之间,说该方法的重现性和稳定性良好。该方法简便快速,能够进行现场检测,可在15分钟内完成检测,直接给出检测结果,该方法可用于大批量样品的筛查,应用前景广阔,值得推广3.利用T-2单克隆抗体制备了免疫亲和柱,建立了免疫亲和柱净化-液相色谱三重四级杆串联质谱方法检测谷物及饲料中的T-2毒素,该方法LOD为0.05ng/mL,LOQ为0.17ng/mL。在0.5ng/mL～500.0ng/mL范围内,相关系数为0.9997,加标回收率92.9%-109.7%。