弓形虫病是一种由刚地弓形虫引起的人兽共患寄生虫病,广泛分布于世界各地。动物感染弓形虫后,非常容易引起流产、死胎等临诊症状,严重威胁畜牧业的健康发展,人常因食用了含有弓形虫的食品而感染,因此在畜牧业以及食品安全方面,弓形虫的监测与防控十分重要。对弓形虫病的准确诊断是有效防控弓形虫病的前提,组织涂片染色等传统病原学检查费时费力且检出率低下,且为死后诊断;间接血凝试验、酶联免疫吸附试验等免疫学方法主要检测抗体,不能作为现症感染依据。而聚合酶链式反应（PCR）准确度高、操作简便、特异性和敏感度高,很好的避免的以上检测手段的缺陷,但需要筛选理想引物和建立良好的反应体系。本研究以弓形虫GRA14作为靶基因建立了特异PCR检测方法,结果显示本实验设计的引物对弓形虫具有高度的特异性,检测方法灵敏度高,最低可检测2.35个弓形虫速殖子,经设计和实验优化的PCR反应体系和反应程序可用于弓形虫病诊断和分子流行病学调查。以建立的特异PCR检测方法对2016年采自国内不同省份的26个集约化猪场963份样品进行弓形虫病的检测和分析,结果显示,陕西省猪场弓形虫阳性率最高,为31.7%;贵州省猪场弓形虫阳性率27%,位列其次;广东省猪场弓形虫阳性率为13.4%;福建省猪场弓形虫阳性率为8.9%;采自安徽省的样品未检出阳性。在猪不同生长阶段的弓形虫感染情况比较结果显示,种母猪阳性率达到了18.6%,种公猪弓形虫阳性率为12.7%,种猪的阳性率高;育肥猪阳性率较低,为4.8%。不同类型样品的特异PCR检测结果显示,血液、废料、尿液、组织、精液、废水均可检出弓形虫阳性,血液样品更适用于猪场弓形虫病的临床诊断和监测。以建立的特异PCR检测方法于2018年5月至2018年11月对四会市部分肉菜市场猪、牛、鸡肉共324份样品进行检测和分析,结果显示,猪弓形虫阳性率最高,为25.0%;牛弓形虫阳性率其次,为21.3%;鸡弓形虫阳性率最低,为15.7%。在不同月份间的弓形虫流行病学调查显示,市售鸡肉和猪肉的7月份采集的样品弓形虫阳性率最高,牛样品11月阳性率最高。本研究以弓形虫GRA14作为靶基因,建立了敏感、特异的PCR检测方法,对2016年采集的国内部分集约化猪场弓形虫感染情况进行检测和分析,并对广东四会市肉菜市场的1287份牛、猪、鸡肉样本进行了检测,为人兽共患弓形虫病的有效防控提供流行病学数据。