【摘 要】
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Rab蛋白和retromer复合体均为真核细胞中重要的转运相关蛋白,已有研究表明哺乳细胞和酿酒酵母中Rab7（Ypt7）蛋白能够和retromer复合体的受体-选择亚单位Vps26/Vps29/Vps35互作,可能是Rab7（Ypt7）的下游效应子。稻瘟病菌（Magnaportheoryzae）是禾本科作物重要病原菌,前期研究表明稻瘟病菌中MoYPT7和retromer复合物核心成员MoVPS35
【基金项目】
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国家自然科学基金（No.31270179）；
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Rab蛋白和retromer复合体均为真核细胞中重要的转运相关蛋白,已有研究表明哺乳细胞和酿酒酵母中Rab7（Ypt7）蛋白能够和retromer复合体的受体-选择亚单位Vps26/Vps29/Vps35互作,可能是Rab7（Ypt7）的下游效应子。稻瘟病菌（Magnaportheoryzae）是禾本科作物重要病原菌,前期研究表明稻瘟病菌中MoYPT7和retromer复合物核心成员MoVPS35均为稻瘟病菌致病相关基因,并且发现两者基因敲除突变体表型相似。为了明确稻瘟病菌中MoVps35和MoYpt7间的互作关系及调控致病性机制,我们首先进行了 Co-IP实验,结果表明MoVps35能和MoYpt7互作。进一步将mCherry-MoYpt7和MoVps35-GFP共表达于野生型菌株Guy11中,发现mCherry-MoYpt7能和MoVps35-GFP共定位。此外,MoYPT7基因的缺失导致MoVps35的定位发生改变,但在ΔMovps35中MoYpt7的定位并未发生改变,说明MoYpt7可能对MoVps35的招募起重要作用。无论在ΔMovps35中过量表达MoYPT7还是在ΔMoypt7中过量表达Mo VPS35,均无法恢复突变体的表型,说明二者间不存在上下游的转录调控方式。为明确稻瘟病菌中MoYpt7是否以依赖GTP或是GDP的形式作用于MoVps35,进一步的Co-IP实验结果证实MoYpt7两种不同结合状态蛋白MoYpt7-CA（GTP结合状态）和MoYpt7-DN（GDP结合状态）都能和MoVps35互作,说明MoYpt7与MoVps35互作不依赖激活型或失活型的MoYpt7,因而MoVps35不是MoYpt7的效应子。此外,MoVps35-GFP在Mo Ypt7-CA和MoYpt7-DN菌株中的定位和野生型相比没有明显改变。以上结果表明:稻瘟病菌中MoYpt7能和MoVps35互作并将MoVps35招募至晚期内涵体,但是MoVps35不一定是MoYpt7的效应子,这一调控机制有别于酿酒酵母和哺乳动物中的调控机制。
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